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目的：本研究通过体内外实验探讨柞蚕抗菌肽抗瘤效果，及其作用机理。 方法：1．柞蚕抗菌肽对CNE2细胞毒性作用。以鼻咽癌最常用的有效化疗药物氟尿嘧啶（5-FU）为阳性对照，采用MTT比色法检测柞蚕抗菌肽对CNE2细胞株的细胞毒性作用；Annexin V／PI双标法，测定CNE2细胞的凋亡率；抗微管蛋白单克隆抗体检测CNE2细胞骨架结构的变化；透射电镜观察CNE2细胞超微结构的改变。 2．柞蚕抗菌肽对荷瘤裸鼠抗瘤作用。建立荷人鼻咽癌细胞株CNE2的裸鼠模型，随机分为4组，柞蚕抗菌肽通过腹腔注射和局部注射两种途径进行治疗干预实验，以注射生理盐水为阴性对照组和注射5-FU为阳性对照组。每天1次，连续用药3天，用药后第10天取血计数白细胞，处死动物，称量裸鼠肿瘤大小，比较抑瘤率，取裸鼠肿瘤组织作常规病理切片观察，了解柞蚕抗菌肽对肿瘤的治疗效果，取裸鼠心脏、肝脏、肾脏作常规病理观察，了解柞蚕抗菌肽对裸鼠的毒性作用。 结果：1．体外实验结果：柞蚕抗菌肽对CNE2细胞的杀伤作用有明显的剂量效应关系，浓度越高、时间越长抗菌肽对CNE2细胞的抑制率越高（P＜0.01），300μmol／L抗菌肽作用72h细胞抑瘤率可达到84.78％。柞蚕抗菌肽作用72h的IC50为222μmol／L。抗菌肽的抑瘤率低于5-FU（P＜0.01）。作用24h、48h 300μmol／L抗菌肽可以达到和75μmol／L 5-FU基本相似的抑瘤率（P＞0.05），作用72h300μmol／L抗菌肽细胞抑瘤率高于75μmol／L 5-FU（P＜0.01）。凋亡率随抗菌肽第一车伍人学Ig［＊叮究生论义 作用浓度的增加而相应增加，在作用48小时左右达到高峰，作用 超过72小时后有所降低。免疫组织化学染色见抗菌肽处理后细胞 骨架分休不均匀，形态不规则，散乱，卷缩；透射电镜下观察经柞 蚕抗菌肽处理后的肿瘤细胞结构发生明显变化，细胞膜破损，细胞 器内容物泄出胞外，线粒体出现广泛性电子密度减低，肿胀、峭断 裂；可见部分凋亡细胞，异染色质边聚，细胞核中央常染色质疏松， 细胞器基本正常。 2．体内实验结果：柞蚕抗菌肽对荷人鼻咽癌CNEZ裸鼠治疗效果明 确而肯定。三个治疗组与正常对照组相比较均有显著差异o刃刀1)， 柞蚕抗菌肽局部治疗组与5fU治疗组相比较无显著差异o＞0刀5)， 柞蚕抗菌肽两组间比较有显著差异尸刃．01卜腹腔组柞蚕抗菌肽。 局部组柞蚕抗菌肽和 5fU抑瘤率分别为 59．26O石2．61O和 83．23O。 常规病理切片观察，5FU处理组瘤组织内出现大片状出血坏死灶伴 有少量淋巴细胞浸润；柞蚕抗菌肽腹腔处理组瘤组织内出现小片状 出血坏死灶伴有少量炎细胞浸润；柞蚕抗菌肽局部处理组癌瘤大面 积出血坏死，坏死区内及残存癌细胞周围较多炎细胞浸润呈包围 状，可见到淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞浸润，以淋巴细胞为 主。柞蚕抗菌肽治疗后裸鼠心脏、肝脏、肾脏未见明显病变，外周 血白细胞无明显下降。结论：柞蚕抗菌肽具有较明显的抑制人鼻咽癌的作用，并且无明显毒副 作用，是一种较理想的新型抗肿瘤药物。