山茱萸多糖的研究

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目的:山茱萸为我国一味常用的中药材。现在医学研究表明,山茱萸具有多种生物活性,并认为山茱萸多糖是其中一类主要活性成分。因此,明确其化学结构以及含量,确定其制备工艺和质量控制标准,可进一步揭示山茱萸的药用价值和开发潜力,为山茱萸的进一步研究提供必要的基础工作。材料与方法:本文以山茱萸成熟干燥果肉为原料,采用水提醇沉法提取,确定最佳提取及醇沉工艺;建立山茱萸多糖的含量测定方法;采用柱层析法对提取的多糖进行分离和纯化,并对其单糖组成进行研究,明确其单糖组成的种类和比例,最后,对提取的山茱萸多糖进行体外抗氧化实验以及体内免疫和降血糖实验,明确其药理作用。结论:1通过正交试验,确定山茱萸多糖的最佳提取工艺。山茱萸多糖的最佳提取工艺为:料液比1:30(g/mL),提取时间为4小时,提取温度为100℃,提取次数为3次。2对22个不同商品地的山茱萸多糖进行含量测定,结果显示:不同商品地的山茱萸多糖含量存在一定的差距。其中辽宁营口的山茱萸多糖含量最高,为6.22%;北京的含量最低,为1.68%。采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,该方法简单、快速、准确。3采用水提醇沉法制得山茱萸粗多糖,通过DEAE-cellulose DE-52柱层析梯度洗脱对山茱萸多糖进行分离,得到五个不同部分A、B、C、D、E。再利用SephadexG-100柱层析对多糖A进行纯化,得到山茱萸多糖Aˊ。SepharoseCL-6B凝胶柱色谱法对山茱萸多糖A′的纯度进行检定,苯酚-硫酸法跟踪检测,结果表明山茱萸多糖Aˊ为均一多糖。山茱萸总多糖经薄层色谱和高效液相色谱分析,该多糖由葡萄糖、木糖和鼠李糖组成,其摩尔比为1:1.77:1.31。4通过体外和体内药理学试验,结果表明山茱萸多糖具有体外抗氧化活性,并能提高小鼠的免疫活性,降低糖尿病大鼠的血糖。
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