NADC30-like PRRSV的致病性研究及其全长cDNA克隆的构建

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:andytong0123
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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的严重的繁殖障碍、断奶后肺炎、生长减缓、精神沉郁等为主要症状的猪传染病。PRRS亦称蓝耳病,是世界范围内普遍存在的猪病之一。1980年首次在美国报道,并在养猪业中造成了巨大的经济损失。1992年,在我国台湾发现了TW91株;1996年,在我国大陆出现了经典型毒株CH-1a株;2006年,高致病性PRRSV(HP-PRRSV)引起了异常高的死亡率,持续多年威胁着我国养猪业。更为严峻的是,2015年至今,出现了多种类NADC30毒株。现如今,对于PRRS最有效的防控手段是疫苗免疫接种,虽然国内外对PRRSV已有大量的研究,但是对我国当前流行的类NADC30毒株的分子特征及致病性等尚不明确。本课题通过对四川某猪场送检的疑似PRRS的临床病料进行了病原的分离与鉴定,结果表明:该毒株属于类NADC30 PRRSV毒株,将此次分离得到的毒株命名为SC-d株,利用生物信息学软件对其基因组进行系统的分析。序列比对分析表明,SC-d株Nsp2基因的序列中存在3处(323-433 aa、483 aa和504-522 aa)共计131 aa缺失。重组分析表明,SC-d株是类NADC30毒株与高致病性毒株的重组毒株。同时,我们评估了其致病性,接种SC-d的仔猪表现出持续发热,体重适度减轻,胸腺轻度萎缩和肺部病变,其致病性低于HP-PRRSV HuN4株。最后,我们成功的拼接了SC-d株的全长基因组,尝试构建SC-d株感染性克隆,但未能成功构建。总之,本研究系统的分析了类NADC30毒株的生物学特性,并进行了感染性克隆构建的尝试,这些研究将为我国当前流行的NADC30毒株的防控提供理论基础与技术支持。
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