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苦瓜(Momordica charantiaL.)是一种极具开发潜力和应用价值的药食两用植物。苦瓜伤流液(Momordica charantia L.bleeding sap)是指苦瓜收获结束后,将主茎在一定高度剪断,从切口处收集到的液体。我国苦瓜资源丰富,而苦瓜伤流液未得到利用,造成资源的浪费。
目前对苦瓜的报道多限于果实、种子等部位的功能成分提取及其降血糖等生物活性的研究,而对苦瓜伤流液的成分和生物活性的研究尚未见报道。因此,论文以苦瓜伤流液为原料,通过冷冻干燥及喷雾干燥等方法制备苦瓜伤流液干粉,考察其抗氧化及降血糖活性,获得以下主要研究结果:
1.初步确定苦瓜伤流液中总固形物含量为2.9‰~3.5‰,含有酚类等物质;通过正交试验得到加热钝化多酚氧化酶较优工艺参数为:加热温度65℃、加热时间20min、Vc浓度0.3%。在此较优工艺条件下,多酚氧化酶相对残留活性为11.82%。
2.对苦瓜伤流液的冷冻干燥和喷雾干燥工艺进行了研究。苦瓜伤流液经过截留分子量为6kDa的超滤膜超滤后,截留液、滤过液及原液浓缩液分别冷冻干燥,M>6kDa和M<6kDa两部分分别占总固形物含量的21.2%和75.9%;通过正交试验确定喷雾干燥较优工艺条件为:以麦芽糊精为助干剂,伤流液中固形物与助干剂的比例1:2,入料浓度15%,进风温度185℃,入料温度45℃,入料流量40%,此工艺条件下得到的苦瓜伤流液喷干粉对AGEs抑制率为33.36%。
3.急性毒性试验表明,苦瓜伤流液冻干粉经小鼠口服,LD50值在3800~4100mg/kg之间,经典及性能毒性试验与上下移动法急性毒性试验结果基本一致。经推算,苦瓜伤流液喷干粉实际无毒。
4.对苦瓜伤流液冻干粉进行了体外抗氧化活性的研究。结果表明:当浓度达到20mg/mL时,苦瓜伤流液膜分离冻干粉对DPPH·的清除能力都在35%左右;当浓度大于10mg/mL时,其螯合Fe2+的能力均达到85%以上;当浓度为10mg/mL时,其抑制率均在50%左右;同浓度下,FDMBS的总抗氧化能力要强于M>6kDa部分和M<6kDa部分。
5.对苦瓜伤流液干粉的降血糖活性进行研究。经膜分离得到的三种苦瓜伤流液冻干粉都可以显著降低1型糖尿病小鼠的血糖,延缓体重减轻,其中M>6kDa部分的降血糖效果较好,但三种样品间未见显著差异;不同剂量的苦瓜伤流液喷干粉对正常小鼠和1型糖尿病小鼠进行降血糖试验,结果表明:苦瓜伤流液喷干粉可以降低小鼠血糖水平,提高血清和肝脏SOD活力,降低血脂水平,同时还可以降低1型糖尿病小鼠的糖化血红蛋白含量。
6.鉴于糖尿病异常代谢状态下可生成大量活性羰基化合物,故采用同步荧光光谱法测定小鼠血清羰基相对含量,探讨糖尿病小鼠血糖与血清羰基相对含量的关系。结果表明,正常和1型糖尿病小鼠血糖与血清羰基相对含量之间有很好的相关性,相关系数R2=0.8876。