研究背景系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）是一种累及全身多系统、多器官，临床表现复杂的自身免疫性结缔组织病。它是以自身免疫系统异常，自身抗体、补体激活，免疫复合物沉积为特征。SLE好发于育龄期女性，发病率男女性别比约为1∶9。SLE的发病机制至今尚不明确，一般认为SLE的致病因素包括遗传因素、环境因素和内分泌因素。这些因素相互影响、相互作用导致SLE的免疫异常。细胞因子能够参与多种免疫细胞的分化、成熟及活化，在炎症反应和免疫调节中发挥重要作用。研究证实在自身免疫病中存在多种细胞因子的表达异常，细胞因子不仅参与免疫调节，而且与局部炎症反应和组织损伤有密切关联。大量研究证实多种细胞因子可能参与了SLE的发病，如白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6），IL-12，IL-10，IL-17，IL-18，干扰素-γ（interferon-γ, IFN-γ），肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）等。IL-6是一种由T，B淋巴细胞，巨噬细胞，成纤维细胞和单核细胞分泌的多效性前炎症细胞因子，它能够促进T淋巴细胞增殖、B淋巴细胞成熟、增殖分化为产生自身抗体的浆细胞。IL-6的表达受其基因的调控，之前的研究发现IL-6基因启动子区域rs1800796位点多态性能够影响IL-6转录水平。在国外的多项研究中，IL-6单核苷酸多态性（single nucleotidepolymorphisms, SNPs）位点rs1800796被证实与SLE等多种自身免疫病的遗传易感性有关。但在中国汉族人群中IL-6rs1800796位点多态性与SLE是否存在关联尚未得到证实。基于以上内容，本课题拟采用病例对照的研究方法，利用TaqMan技术、ELISA法，分别检测SLE患者及正常对照IL-6基因单核苷酸多态性及IL-6血清水平，以探讨其与SLE发病之间的关系。研究一IL-6基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究目的比较SLE患者和正常对照者IL-6rs1800796SNP位点的等位基因和基因型频率的差异，探讨IL-6rs1800796SNP位点与SLE易感性的关联。并结合临床资料，探讨IL-6rs1800796与SLE各临床表现之间的关联。方法所有病例均来自安徽省立医院和安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科门诊和住院部的SLE患者（均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE分类标准），共672例。按照年龄、性别构成进行匹配，在健康体检中心及健康的研究生志愿者中收集576例作为正常对照。其中，病例组女性596例，男性76例，平均年龄（35.17±11.37）岁；对照组女性506例，男性70例，平均年龄（35.82±12.41）岁。采用自行设计的调查问卷，收集研究对象的一般情况和临床资料，在获得知情同意后，采集SLE患者及正常对照者的外周静脉血，提取DNA，应用TaqMan探针及ABI7300PCR仪检测SLE患者和正常对照者IL-6rs1800796位点的等位基因和基因型频率。运用Excel2003软件建立数据库，录入患者临床资料，采用SPSS10.01软件进行统计分析，χ~2检验或确切概率法用于比较两组间等位基因、基因型频率的分布差异，Stata10.1软件用于分析哈迪-温伯格平衡（Hardy-Weinbergequilibrium, HWE）。检验水准α=0.05。结果（1）SLE患者中，rs1800796分型成功率为99.11%(666/672)（女性591例，男性75例），对照组中，rs1800796分型成功率为98.78%(569/576)（女性499例，男性70例）。基因分型结果在病例组和正常对照组中均符合HWE。（2）rs1800796位点多态性与SLE的关联性研究SLE患者组CC、CG、GG的基因型频率分别为55.0%、37.2%和7.8%，对照组分别为53.6%、39.2%和7.2%；SLE患者组C和G等位基因频率分别为73.6%和26.4%，对照组则为73.2%和26.8%。以G/G基因型作为参照，两组基因型频率分布的差异无统计学意义（CGvs. GG：OR=0.877，95%CI=0.560-1.372，P=0.565；CC vs. GG：OR=0.946，95%CI=0.611-1.464，P=0.804；CG+CC vs. GG：OR=0.917，95%CI=0.599-1.403，P=0.689），等位基因频率分布的差异也无统计学意义（C vs. G：OR=1.019，95%CI=0.852-1.219，P=0.833）。（3）位点rs1800796C等位基因频率在浆膜炎患者中低于非浆膜炎患者（OR=0.530，95%CI=0.308-0.910，P=0.019）。而C等位基因频率与SLE其他临床表现，如颧部红斑、盘状红斑、光敏感、口腔溃疡、关节炎、狼疮脑病以及狼疮肾炎无统计学关联。结论本实验结果提示中国汉族人群IL-6rs1800796基因多态性与SLE遗传易感性无统计学相关。rs1800796中的C等位基因可能在同时伴发浆膜炎的SLE患者中起保护作用。研究二IL-6血清水平与系统性红斑狼疮的相关性研究目的比较SLE患者和正常对照者，狼疮肾炎患者和非狼疮肾炎患者，疾病活动期患者和非疾病活动期患者之间血清IL-6表达水平的差异，分析血清IL-6水平与SLE患者临床特征、实验室检测指标之间的关联性。方法88例SLE患者（男性3例，女性85例）均来自安徽省立医院和安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科的门诊及住院患者，SLE的诊断依据1997年美国风湿病学会修订的SLE分类标准。对照来自安徽医科大学第一附属医院健康体检中心健康体检者和研究生健康志愿者，共86例（男性2例，女性84例），与病例按照年龄、性别匹配。问卷调查收集研究对象的一般情况和临床资料，并进行SLE疾病活动指数（systemic lupus erythematosus disease activity index, SLEDAI）评分。获得研究对象知情同意后，抽取外周静脉血，提取血清冻存，采用ELISA试剂盒检测血清IL-6表达水平。采用SPSS10.01软件进行统计分析，检验水准α=0.05。结果（1）不同组别间血清IL-6水平的比较SLE患者组与正常对照组的血清IL-6浓度分别为：（37.18±11.80）pg/mL和（40.41±10.78）pg/mL，差异无统计学意义（t=-1.879，P=0.062）；SLE合并肾炎组与未合并肾炎组的血清IL-6浓度分别为：（40.88±10.66）pg/mL和（34.40±11.68）pg/mL，差异有统计学意义（t=-2.646，P=0.010）；活动期与非活动期SLE患者血清IL-6浓度分别为：（37.40±10.97）pg/mL和（36.70±13.70）pg/mL，差异无统计学意义（t=-0.254，P=0.800）。（2）对SLE患者血清IL-6浓度与SLEDAI进行相关性分析结果并未发现两者存在统计学相关（rs=0.101，P=0.350）。（3）血清IL-6水平与临床特征和实验室检测指标的关联对各临床症状阳性组与阴性组之间的血清IL-6水平的差异均无统计学意义（P>0.05）。对实验室检测指标阳性组与阴性组的血清IL-6水平进行分析，抗ds-DNA抗体阳性组和阴性组的血清IL-6浓度的差异有统计学意义（（41.02±12.35）pg/mL vs.（34.99±1.47）pg/mL，t=-2.365，P=0.020）、补体降低组和未降低组之间的差异有统计学意义（（41.22±11.85）pg/mL vs.（34.26±10.98）pg/mL，t=-2.836，P=0.006））。血沉升高组与未升高组之间的差异有统计学意义（（41.22±9.08）pg/mL vs.（34.02±11.56） pg/mL，t=-2.628，P=0.010）、有蛋白尿组与无蛋白尿组之间的差异有统计学意义（（41.34±9.68）pg/mL vs.（35.72±12.20）pg/mL，t=-1.996，P=0.049），其他指标阳性组与阴性组血清IL-6水平的差异无统计学意义（P>0.05）。结论本研究未发现SLE患者组与正常对照组、疾病活动组与非活动组之间的血清IL-6表达水平的差异，但狼疮肾炎组与非狼疮肾炎组血清IL-6水平存在差异，IL-6水平与SLE患者的部分实验室检测指标之间存在关联。