目的:放射治疗（radiotherapy,RT）是中晚期肿瘤治疗的重要方法之一,也是早期肿瘤切除后的重要补充手段,能够有效提高患者的生存率和生存时间。然而,放疗在杀伤肿瘤细胞的同时,也会对正常组织和细胞产生影响。人体内的淋巴细胞对射线具有较高的敏感性,放疗可引起部分淋巴细胞的死亡和再分布,进而导致人体免疫系统的改变。随着放疗技术的发展,调强适形放疗（intensity-modulated radiotherapy,IMRT）已被广泛应用于头颈部,前列腺和胸部等恶性肿瘤的治疗,具有靶区放射剂量较高,而正常组织损伤较小的特点。为了解IMRT对肿瘤患者免疫功能的影响,本研究对183例患有临床常见肿瘤（肺癌,鼻咽癌,食管癌和直肠癌）的病人,在治疗前后外周血中淋巴细胞及其亚群的水平变化进行观察,并且分析了该变化与性别,年龄,分期,病种等因素的相关性,为今后在IMRT中更为有效地保护免疫系统,以及后续的免疫调节治疗,提供一定的研究数据。方法:选取2015年10月至2017年12月安徽省立医院西区肿瘤放疗科收治的食管癌,肺癌,直肠癌,鼻咽癌四种常见肿瘤患者183例,其中117例行调节性T(Regulatory T cells,T_reg)细胞检测,66例行免疫功能检测。于IMRT前和治疗后1个月抽取晨起空腹静脉血2ml,乙二胺四乙酸盐（ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA）抗凝,室温保存,离体时间不超过4小时。采用鼠抗人CD45,CD3,CD16,CD56,CD19,CD8,CD4,CD25单克隆抗体20μl以及CD127单克隆抗体5μl加入100μl经EDTA抗凝的外周血,避光孵育30min,加入红细胞裂解液,裂解5min,PBS清洗2次,然后行流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测,其中118例T细胞及其亚群比例检测,65例行调节性T细胞检测。分析比较T细胞及其亚群,B细胞,NK细胞及T_reg细胞在IMRT前后的差异,及其与性别,年龄,分期,病种等因素之间的相关性。静脉血2ml用PBS或生理盐水等体积稀释后,加入3ml外周血淋巴细胞分离液,607g（1780rpm）离心,吸出中间层淋巴细胞,经磷酸盐缓冲液（phosphate-bufered saline,PBS）清洗及细胞计数后,稀释细胞密度至1×10⁶/L,加入不同体积的鼠抗人CD45,Lin（CD3/14/19/20/56）,CD117,CD127,CD161及CD294单克隆抗体,4℃避光染色30分钟,染色缓冲液清洗后加入多聚甲醛固定30分钟,离心后上机行流式细胞检测共9例,比较IMRT前后固有淋巴细胞（innate lymphoid cells,ILCs）中ILC1,ILC2,ILC3亚群的变化。结果:1.IMRT后患者外周血中CD3⁺T,CD3⁺CD4⁺Th,CD4⁺CD25⁺,CD4⁺CD25⁺CD127^low/-T_reg,CD4⁺/CD8⁺,CD3^-CD19⁺B细胞的均值较治疗前明显下降,差异有统计学意义,P值分别<0.05,<0.01,<0.01,<0.05,<0.01,<0.01。CD3⁺CD8⁺Ts/Tc,CD3^-CD16⁺CD56⁺NK细胞的均值较治疗前升高,P值分别为<0.01,<0.01,具有统计学意义。2.淋巴细胞及其亚群与患者一般资料中的各种参数之间统计分析发现,患者的性别,年龄,分期和病种并不影响IMRT前后CD4⁺CD25⁺CD127^low/-T_reg细胞的变化,以及CD4⁺/CD8⁺比值改变,而CD3^-CD16⁺CD56⁺NK细胞的百分比在IMRT前后,男性患者均高于女性（P<0.05）。IMRT后女性患者外周血中CD3⁺CD4⁺Th细胞的百分比高于男性（P<0.05）,但IMRT前CD3⁺CD4⁺Th细胞的百分比却无统计学差异（P>0.05）。尽管IMRT前女性患者血液中CD3^-CD19⁺B细胞的百分比高于男性（P<0.05）,但IMRT后两者外周血中的CD3^-CD19⁺B细胞的百分比无显著差异（P>0.05）。IMRT后CD3⁺T淋巴细胞,CD3⁺CD8⁺Ts/Tc细胞和NK细胞在不同病种之间有统计学差异（P<0.05）,IMRT前CD3⁺T淋巴细胞,CD3⁺CD8⁺Ts/Tc细胞和NK细胞不同病种之间无显著差异（P>0.05）。尽管IMRT前CD3^-CD19⁺B细胞不同年龄组间无明显差异（P>0.05）,但IMRT后CD3^-CD19⁺B细胞不同年龄组间存在差异（P<0.05）。3.IMRT后CD3⁺T淋巴细胞比例均值与性别,病种有显著相关性,CD3⁺CD8⁺Ts/Tc细胞比例均值与病种相关,CD3^-CD16⁺CD56⁺NK细胞的比例均值与性别,病种有显著相关性,CD3^-CD19⁺B细胞的比例均值与年龄相关。4.IMRT后患者外周血中ILC2在ILC中所占比例较治疗前明显升高,ILC3较治疗前下降,差异具有统计学意义（P<0.05）,而ILC1所占比例尽管出现变化,表现为IMRT后ILC1升高,但无统计学意义（P>0.05）。结论:IMRT可导致肿瘤患者外周血中淋巴细胞数量和亚群的改变,进而对免疫功能产生影响,并且在治疗后短期内未能完全恢复。因此,需要在IMRT过程中和结束的早期给予免疫调节治疗,以促进机体免疫平衡的恢复,预防照射导致正常组织的过度炎性反应和辐射诱发的二次致癌效应。