AcMNPV全基因组真核表达文库的构建与P78/83蛋白结构域功能研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oyfj2009
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杆状病毒是一类具有杆状衣壳的囊膜病毒,基因组为双链闭合环状DNA,已完成测序的基因组大小为90~230 kb,大约编码89~181种蛋白质。苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)为杆状病毒科的代表种是研究的作为透彻的一种杆状病毒。它的基因组全长约130kb,编码154个开放性阅读框。  与其他病毒不同,杆状病毒的基因呈时序性表达,按照病毒基因表达实相将基因的表达分为四个阶段:极早期(immediate arlyα),早期(earlyβ),晚期(lateγ)以及极晚期(very lateδ)(24)。除极早期基因外,其他时相基因的转录与表达都需要前面时相基因的参与或调控,其中早期基因是病毒复制时的晚期和极晚期基因表达所必需的(80)。  对于AcMNPV基因的研究有利于指导对于其他病毒DNA或RNA以及动植物的相关基因的深入了解。为了更为深入的了解AcMNPV基因组各基因的功能,本实验将AcMNPV全部154个开放性阅读框基因构建到真核表达载体pIZ/V5用于相关基因的表达,亚细胞定位蛋白质相互作用等后续实验。  杆状病毒感染时,病毒核酸的入核需要肌动蛋白的参与。在AcMNPV中,Wiskott-Aldrich syndrome protein(WASP)白的同源蛋白P78/83通过激活Arp2/3复合物参与肌动蛋白构象变化的调控。对P78/83各功能域的研究,有助于揭示P78/83对Arp2/3复合物的作用机理,并进一步展示肌动蛋白构象调控的全过程。
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