短链氯化石蜡对斑马鱼的毒性效应研究

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短链氯化石蜡(Short chain chlorinated paraffins,SCCPs)是一类组成复杂的直链正构烷烃氯代衍生物,在工业中运用广泛。由于具有生物累积性、生物毒性和远距离迁移性,在2017年SCCPs被《斯德哥尔摩公约》列为持久性有机污染物。我国是氯化石蜡生产和使用最多的国家,且尚未限制SCCPs的生产。近年来SCCPs已经在我国各项环境介质,尤其是水环境中被检出,而其毒性效应研究十分有限,因此开展SCCPs对水生动物的毒性效应及机制研究对我国环境管理和风险控制具有重要意义。研究工作如下:1.研究了不同浓度(90、270μg/L)下亚慢性暴露(14天)对一月龄斑马鱼转录水平的影响,结果显示在90μg/L暴露条件下斑马鱼体内显著差异表达基因数量为3126个,随后通过生物信息学手段初步解析了SCCPs对斑马鱼的毒性效应。经KEGG分析后发现SCCPs亚慢性暴露可以干扰斑马鱼体内核糖体、细胞周期、DNA复制、p53信号通路及RNA转运等通路。通过实时荧光定量PCR技术,对转录组中涉及的细胞周期基因及人类疾病相关同源基因的差异表达情况进行验证,结果显示SCCPs可以造成斑马鱼体内上述基因差异表达。2.研究了环境相关浓度(30、60、90μg/L)条件下SCCPs亚慢性暴露对四月龄斑马鱼肠道和肝脏细胞周期相关基因表达的影响,结果表明SCCPs对斑马鱼肠道和器官产生的毒性效应存在差异。酶活测定实验表明在低、中浓度(30、60μg/L)暴露后斑马鱼肝脏内SOD、CAT活性降低,抗氧化防御系统功能受到抑制。而在高浓度(90μg/L)暴露后斑马鱼肝脏内SOD、CAT酶活升高,说明机体启动了补偿机制以应对SCCPs对其造成的不利影响。酶联免疫分析结果表明:在高浓度条件下SCCPs对斑马鱼肠道具有促进炎症反应的效果。3.通过分子对接手段初步探究细胞周期重要蛋白与SCCPs的结合情况,SCCPs可以对接到ORC1配体结合口袋,并改变其三维结构,说明SCCPs可能通过改变蛋白质空间构象影响其正常功能和活性从而对斑马鱼产生毒性效应。
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