【摘 要】
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目的:本研究通过研究慢性心力衰竭大鼠模型,使用荧光定量PCR和Western Blot等方法观察黄芪、葶苈子药对在线粒体动力学层面对衰竭心肌细胞的线粒体动力学相关蛋白Drp1和分裂蛋白Fis1表达的影响,探索药对黄芪、葶苈子治疗心衰心肌细胞的作用机制和治疗效果。同时随机选取60位心衰患者进行临床疗效观察,根据患者的血浆BNP水平,中医证候积分及生活质量评分等评估判断药对黄芪、葶苈子治疗心衰的疗效和
【基金项目】
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国自然基金课题《基于线粒体动力学探讨药对黄芪、葶苈子抗心力衰竭的机理》（81804045）；
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目的:本研究通过研究慢性心力衰竭大鼠模型,使用荧光定量PCR和Western Blot等方法观察黄芪、葶苈子药对在线粒体动力学层面对衰竭心肌细胞的线粒体动力学相关蛋白Drp1和分裂蛋白Fis1表达的影响,探索药对黄芪、葶苈子治疗心衰心肌细胞的作用机制和治疗效果。同时随机选取60位心衰患者进行临床疗效观察,根据患者的血浆BNP水平,中医证候积分及生活质量评分等评估判断药对黄芪、葶苈子治疗心衰的疗效和对心衰症状的改善。为后续对黄芪、葶苈子的进一步研究明提供思路,以造福更多心衰患者。方法:1.动物实验部分:选取80只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组（15只）、造模组（65只）。正常饲养两周后,对造模组大鼠腹腔注射阿霉素（3mg/kg）心衰造模,空白对照组腹腔注射等量生理盐水,每周2次,造模持续4周。在心衰造模的第4周后对两组大鼠分别行心脏彩超检查和血浆BNP检查,检查大鼠:左室射血分数（LVEF）,左室舒张期内径（LVIDd）,左室短轴缩短率（LVFS）,左室收缩期内径（LVIDs）,血清BNP,判断心衰造模是否成功。心衰造模成功后,将造模组中大鼠随机分为曲美他嗪组、黄芪葶苈子低剂量组、黄芪葶苈子高剂量组,模型组,每组15只。并开始药物灌胃,其中高剂量组-黄芪葶苈子5.4mg/kg、低剂量组-黄芪葶苈子2.7mg/kg、曲美他嗪组-曲美他嗪10mg/kg、对照组模型组-蒸馏水2ml/只,qd,药物干预持续6周。于药物干预的第二周及第六周后再一次检查大鼠血浆BNP和心脏彩超并记录。随后处死实验动物取心脏组织,通过荧光定量PCR和Western Blot等方法检测Drp1和Fis1的基因及蛋白表达情况,统计数据并分析对比。2.临床疗效观察部分:随机选取符合要求的慢性心衰患者60位,随机分为对照组和实验组。实验组在常规治疗的基础上加用黄芪葶苈子,对照组在常规治疗的基础上加用曲美他嗪。三个月后对比观察两组患者治疗前后的血浆BNP水平、心功能分级、中医证候积分和明尼苏达心衰生活质量评分等指标变化。结果:1.动物实验结果:造模第4周后心脏彩超示造模组的LVIDs,LVIDd显著低于对照组,P＜0.05。造模组LVFS,LVEF显著高于对照组,P＜0.05。提示心衰造模成功。灌胃第2周及第6周LVEF数据:高剂量组＞曲美他嗪组＞低剂量组＞模型组。BNP测定:模型组＞低剂量组＞曲美他嗪组＞高剂量组,P＜0.05,具有统计学意义。Western-blotting检测和RT-PCR检测结果:Drp1 m RNA表达发现模型组＞低剂量组＞曲美他嗪组＞高剂量组＞对照组。Drp1蛋白表达发现模型组＞低剂量组＞曲美他嗪组＞高剂量组＞对照组。Fis1 m RNA表达发现模型组＞低剂量组＞西药组＞高剂量＞对照组。Fis1蛋白表达发现模型组＞低剂量组＞曲美他嗪组＞高剂量组＞对照组。对比模型组,高剂量组、曲美他嗪组、低剂量组的Drp1,Fis1 m RNA表达量相对降低,P＜0.01。对比曲美他嗪组,低剂量组、和高剂量组Drp1,Fis1 m RNA表达量不存在统计学差异,P＞0.05。对比模型组,高剂量组、曲美他嗪组、低剂量组Drp1,Fis1蛋白表达量下降,P＜0.01。对比曲美他嗪组,低剂量组、和高剂量组Drp1,Fis1蛋白表达量没有统计学差异,P＞0.05。2.临床疗效观察结果:治疗后对比两组中医证候积分,两组积分均有下降,且实验组＞对照组,P=0.005。疗效评价有效率对比试验组（83.3%）＞对照组（66.7%）,P=0.264。对比两组血浆BNP,试验组（577.92±204.95pg/ml）＞对照组（646.90±290.72pg/ml）,P=0.031。对比两组生命质量评分,试验组（24.5±6.8）＞对照组（29.5±5.4）,P=0.003。结论:黄芪、葶苈子能够明显降低心衰大鼠血浆BNP,提高心功能,且高剂量的黄芪、葶苈子效果优于西药组和低剂量组,曲美他嗪疗效优于低剂量中药组,其治疗心衰的机制可能与下调蛋白Drp1和Fis1的表达有关。黄芪、葶苈子配合慢性心衰常规治疗可以更好的增强疗效,提高心功能,改善生命质量。
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