目的　　 本研究的目的是通过建立小鼠外周神经源性疼痛模型(PSNL),探讨Fos蛋白在脊髓Ⅰ-Ⅱ层和在脊髓Ⅲ-Ⅳ的分布情况及其随时间的表达变化,并对Fos蛋白的表达与小鼠疼痛行为的相关性进行分析。　　 实验方法1.PSNL模型:　　 分为假手术组和模型组。　　 假手术组:选用36只ddy雄性小鼠,只切开皮肤,暴露坐骨神经,不结扎。　　 PSNL模型组:选用36只ddy雄性小鼠,采用seltz等的方法对小鼠左侧坐骨神经行部分结扎术。　　 2.实验设计:　　 实验采用完全随机化设计,测量手术后不同时间点小鼠的行为学及Fos蛋白在脊髓背角的表达数目。　　 2.1实验分组假手术组和PSNL模型组:分别将各组的36只ddy小鼠,随机分成以下9小组进行实验。　　 手术前组:手术前测定行为学后,然后灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后1h组:手术后即刻测定行为学,术后1h灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后2h组:手术后1h测定行为学,术后2h灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后4h组:手术后3h测定行为学,术后4h灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后8h组:手术后7h测定行为学,术后8h灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后24h组:手术后23h测定行为学,术后24h灌流,取小鼠脊髓标本术后3d组:手术后3d测定行为学,然后灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后7d组:手术后7d测定行为学,然后灌流,取小鼠脊髓标本。　　 术后14d组:手术后14d测定行为学,然后灌流,取小鼠脊髓标本以上9组在上述处理后,将脊髓冰冻切片行免疫组化染色,观察Fos蛋白在脊髓背角的分布情况。　　 2.2主要检测指标(1)行为学检测热痛敏缩腿阈及机械刺激缩腿阈。　　 (2)免疫组织化学方法检测Fos蛋白在脊髓背角的表达情况。　　 统计学分析　　 所有符合正态分布的计量资料数据以均数±标准差(-x±s)表示,应用SPSS13.0版统计学软件,采用单因素方差分析法进行检验,各处理组与对照组间的比较采用DUNNETT过程,各组间两两比较采用S-N-K过程。P<0.05认为差异具有统计学意义。　　 结果　　 1.小鼠的行为学测定:　　 (1)热痛敏缩腿阈:PSNL模型组的热痛敏缩腿阈在手术后迅速降低,直至术后14d仍明显低于小鼠手术前的热痛敏缩腿阈(P<0.05)。　　 (2)机械刺激缩腿阈:PSNL模型组的机械刺激缩腿阈在手术后迅速降低,直至术后14d仍明显低于小鼠手术前的机械刺激缩腿阈(P<0.05)。　　 2.Fos蛋白表达情况(1)脊髓背角Ⅰ-Ⅱ层:假手术组Fos阳性神经元的数目在术后2小时达到最高水平,约为21.94±2.55个,4h后降至1.56±0.55个。PSNL模型组Fos阳性神经元的数目在术后2小时达到最高水平约为61.93±9.36个,4h后逐渐降低,并于术后7d降到0.75±0.35个。　　 (2)脊髓背角Ⅲ-Ⅳ层:假手术组Fos阳性神经元术后2小时约为8.19±0.72个,4h迅速降至0.25±0个。PSNL模型组Fos阳性神经元数目在2小时增加志19.63±15.21个,4h达到最高水平,为22.68±1.39个,8小时后下降为0。　　 (3)在术后同一时间点,PSNL模型组Fos蛋白在脊髓Ⅰ-Ⅱ层和脊髓Ⅲ-Ⅳ层表达增多的程度均明显大于假手术组。　　 (4)PSNL模型组和假手术组中,Fos蛋白在脊髓Ⅰ-Ⅱ层的表达远多于脊髓Ⅲ-Ⅳ层。　　 结论　　 1.PSNL诱导的Fos蛋白表达在脊髓Ⅰ-Ⅱ层呈时间依赖性改变,术后2h达到高峰,之后逐渐降低,术后7d降到正常水平。　　 2.PSNL诱导的Fos蛋白表达在脊髓Ⅲ-Ⅳ层呈时间依赖性改变,2h开始增加,4h达到高峰,8h降到正常水平。　　 3.PSNL诱导的c-Fos阳性神经元表达增加主要在脊髓Ⅰ-Ⅱ层。　　 4.Fos蛋白表达与小鼠疼痛行为在时间上没有明显的相关性