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三氧化砷(Arsenic trioxide,ATO)作为有效的肿瘤治疗药物有着悠久的历史,但随着长时间的应用其心肌毒性已经是不可忽视的严重副反应,影响了进一步的治疗。因此,寻找减少三氧化二砷的毒副作用,保护心脏不受到诱导损伤的有效成分,尤其是天然低毒多靶点多通路的化合物是研究的新热点和新方向。本论文以百华花楸果实作为原料,提取其有效组分百华花楸黄酮(Sorbus pohuashanensis(Hante)Hedl.flavonoids,SPF),采用SPF含量及其抗氧化活性双效指标,以超声辅助提取方法通过中心组合设计响应面法进行提取工艺优化,聚酰胺柱层析单因素实验进行纯化工艺参数优化。应用MTT检测确定SPF生物活性。采用UPLC-Q-TOF-MS等方法对SPF进行组成及结构进行分析。通过体内建立ATO诱导小鼠心肌损伤模型,采用心电测量、HE染色、酶活检测及Western blot蛋白定量,揭示SPF的防护作用及机制。采用体外建立ATO诱导H9c2心肌细胞损伤模型,借助Hoechst33342、AV/PI染色等方法观察细胞凋亡,酶活检测及Western blot蛋白定量揭示了SPF对ATO诱导H9c2细胞损伤的防护机制。最佳提取工艺参数:乙醇浓度81%,料液比10:51,超声温度52℃为最佳,SPF为294.06?13.24(GAE/100g)。ABTS的TEAC值为41.86?2.52(μmol TE/g),DPPH的TEAC值为33.29?1.13(μmol TE/g)。最终纯化工艺参数为:上样液p H为4、上样量为15m L、乙醇浓度70%、洗脱流速3m L/min。最终提取物具有对ATO诱导损伤有预保护作用。发现SPF主要由十几种黄酮类化合物组成,分别为芦丁、金丝桃苷,山奈酚-3-O-吡喃鼠李糖苷-7-O-吡喃葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖、金圣草黄素-7-O-葡萄糖、楮树黄酮醇B、金圣草素、黄杞苷、牡荆素-2-O-鼠李糖苷、甲基花青素、棕矢车菊素、异鼠李素等黄酮,并计算了相对质量百分含量。SPF预防护可使体重、心脏重量的大幅下降,使发生改变的心电图趋于正常,显著的减少了肌纤维断裂、空泡形成等病理改变。在心肌酶谱中使CK、CK-MB、LDH、GOT的活性下降,同时能够促进体内抗氧化酶系SOD、CAT、GSH-Px的活性,降低了ATO诱导的氧化应激。分子表达中Akt/p-Akt的蛋白表达升高,预示PI3K/Akt信号途径的开启;线粒体凋亡通路中的Bcl-2/Bax蛋白表达比率降低,使线粒体依赖凋亡减少;外源性和内源性死亡受体途径中,caspase-8和caspase-9表达量下调,减少caspase-3最终表达,使心肌损伤降低。SPF改善了ATO引起的细胞形态的改变,降低了凋亡率。降低LDH、GOT的活性,促进抗氧化酶系SOD、CAT和GSH-Px的活性,减少了ROS的产生,增强了细胞抗氧化系统的活性。在分子水平从PI3K/Akt信号途径出发,Akt/p-Akt的蛋白表达增加,进一步引发了Nrf2的蛋白表达增加,最终使Ⅱ相解毒酶HO-1的表达量升高,激活了抗氧化应激通路,减少细胞损伤。同时SPF在线粒体凋亡途径上,有效增加了Bcl-2的蛋白表达,降低了促凋亡蛋白Bax的表达,并促进caspase-9的表达,最终使caspase-3表达相应减少,确定了对线粒体的防护机制通路。外源性途径中,膜外的刺激可以使caspase-8的表达增加,caspase-3相应减少,确定在细胞死亡受体途径的作用机制。本论文表明SPF作为有效成分,具有很好的抗氧化活性,能够预防体内心肌和体外细胞系受到ATO诱导的凋亡和损伤,SPF通过抗氧化应激通路、线粒体凋亡途径和外源性凋亡受体途径来预防ATO对心肌细胞系H9c2及小鼠心脏诱导损伤的防护作用机制。本研究揭示百华花楸黄酮类化合物多通路多靶点的预防作用机制,对开发天然产物百华花楸黄酮防护化疗药物毒副作用具有理论和现实意义。