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目的:肺炎链球菌的MIC药敏方法在全自动微生物系统的评价与临床应用,提高药敏准确度。比较仪器与手工方法、参考方法的MIC的实用性,治疗肺炎链球菌感染的有效性,避免青霉素假耐药、合理使用抗生素减少耐药菌株产生进行相关研究。方法:选择2007至2008年在重庆医科大学附属儿童医院呼吸内科、神经内科、心内科、血液内科、肾内科、内分泌科、新生儿病房、外科及重症监护室(Intensive care unit, ICU)住院的怀疑感染性疾病儿童35598例,采集血液、痰液、胸水、脑脊液、咽拭子、分泌物进行细菌培养,分离鉴定肺炎链球菌。对不同年龄的患儿分组,采用K-B法对青霉素的耐药性进行菌株筛选检测,测定其抗菌药物敏感性。选择88例感染患者的肺炎链球菌样本进行MIC方法的评价与应用。用BD Phoenix的全自动微生物MIC药敏检测系统、K-B法及E-test药敏实验与参考方法微量肉汤稀释法进行方法学比较。比较初筛实验与参考方法的差异以及符合标准方法的药敏结果。根据临床和实验室标准协会(The Clinical and Laboratory Standanrds Institute,CLSI)规定的药敏折点,对四种方法测得的药敏结果进行临床病例的解释与分析。对感染患儿经验性用药进行分析,按照经验性用药分为单一用药组及联合用药组,对两组进行好转、治愈、转归的分析与研究。结果: 35598标本细菌培养结果,共培养G-、G+、真菌共19629株细菌,其中,1643株(8.37%)为肺炎链球菌。从深部痰、咽拭子、脓液、分泌物、血液、胸水、脑脊液培养的肺炎链球菌分别占97.93%、0.61%、0.49%、0.49%、0.24%、0.18%、0.06%。呼吸内科来源最多,占53.70%,其次为心内科(10.90%),内分泌科(9.4%)。肺炎链球菌感染患者中,小于2岁组青霉素耐药率明显高于>2岁组(P<0.05)。K-B法药敏试验中,83.0%苯唑西林初筛耐药,红霉素耐药率95.88%,阿奇霉素95.02%。88株临床肺炎链球菌的方法学评价:BD Phoenix MIC的标准符合率(CA)为99.0%,有1个大错误(克林霉素)及10个小错误(2个青霉素、2个头孢吡肟、2个美罗培南、2个四环素、1个头孢噻肟及1个复方新诺明)。K-B法的CA(除外青霉素)为99.2%,青霉素假耐药为10.23%;E-test的CA为98.5%。BD Phoenix的平均出报告时间为12.7±5.0小时。81肺炎链球菌呼吸道感染病例中,胸部X片无一例为典型表现。经验性治疗以头孢类药物使用频率最高(45.0%)。61株(69.3%)为联合用药,年龄小于2岁组抗生素使用种类多余大于2岁组(P<0.05)。单一用药组与联合用药组,在治疗转归上无差异。按照K-B初筛药敏结果使得临床治疗选用了不必要的广谱抗生素。结论:儿童肺炎链球菌耐药现象十分严重,且经验性用药方面抗生素使用较频繁,MIC的参考方法微量肉汤稀释法由于费时、繁琐在临床微生物实验室无法推广与应用,K-B法对青霉素的初筛结果不能正确指导临床用药。假性青霉素耐药无法避免。新近研发的全自动微生物细菌鉴定药敏仪器BD Phoenix,在检测肺炎链球菌药敏实验功能上设计MIC,通过四种方法的评价实现了与传统的方法准确性,同时在检测速度加快、报告时间缩短,能在临床微生物实验室广泛应用。通过临床感染病例的相关研究,在治疗、预防避免青霉素假耐药,能为临床在疾病的早期提供正确用药指导。