肝细胞癌病人外周血调节性T细胞变化及其临床意义

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目的肝细胞癌(以下简称肝癌)是我国最常见的恶性肿瘤之一,肝癌是世界第五大恶性肿瘤,在我国恶性肿瘤死亡率中居第二位。CD4+CD25+T细胞(regulatory T cells,Tregs)是具有特定表型和抑制功能的T淋巴细胞亚群,能通过多种机制抑制一系列免疫反应,促使肿瘤细胞免疫耐受、逃逸。本研究利用流式细胞技术检测肝癌病人外周血CD4+CD25+FOXP3+Tregs水平变化,明确肝癌病人的肿瘤免疫状态,探讨外周血Tregs变化的临床意义,为临床评价肝癌免疫状态及预后、提供新的途径。方法选择在中国医科大学附属第一医院住院34例肝癌患者作为研究对象,乙肝后肝硬化患者16例,30例同龄健康人群作为正常对照组。清晨空腹采静脉血2ml,肝素抗凝,Ficoll淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,分离出外周血单个核细胞(PBMC),荧光免疫抗体标记后流式细胞术检测PBMC中CD4、CD25和FOXP3的表达水平,应用Cell quest软件分析流式检测结果。各亚群细胞占淋巴细胞比率从流式分析结果图中直接读取,细胞绝对数通过采血当天的血常规结果进行计算。比较各组之间CD4+CD25high和CD4+CD25+FOXP3+Tregs绝对数和比率差异。结果肝癌组CD4+CD25high占CD4+T细胞的比率高于健康对照组(P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞较对照组亦明显增加(P<0.01);肝癌Ⅲ期患者CD4+CD25high/CD4+T细胞的比率高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05)。结论1、肝细胞癌病人外周血CD4+CD25high/CD4+、CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞比率较正常人群显著升高,说明肝癌病人免疫功能异常,细胞免疫功能处于抑制状态2、随着临床分期进展,外周血CD4+CD25high/CD4+、CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞比率增加显著,免疫抑制程度逐渐加重,说明可能与肿瘤的进展有关3、检测上述调节性T细胞,有助于评价和监测肝癌病人细胞免疫状态的变化
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