云南宣威肺腺癌细胞系XLA-0610的建立及其SP细胞亚群初步分析

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背景与目的:肺癌是当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一。在我国,肺癌的发病率和死亡率也一直呈上升趋势,而云南省宣威地区又是我国肺癌高发地区之一,女性肺癌死亡率居全国首位。本研究旨在建立云南宣威女性肺腺癌细胞系,为高发肺癌的防治研究提供理想的体外实验模型。并且对此株细胞进行初步的SP细胞亚群分析,来探索其肿瘤干细胞的相关特性,为云南宣威女性肺腺癌的诊断和治疗提供新的契机和分子靶点。方法:1.用手术切除的新鲜肺癌组织标本进行原代培养,通过光镜、电镜、生长曲线、倍增时间、生长分数、分裂指数、双层软琼脂培养、流式细胞仪、染色体及其G—显带分析及肿瘤标志物检测等对其生物学特性进行分析鉴定,来建立细胞系。2.制备此株肺腺癌细胞系XLA—0610的细胞悬液,一组加入Hoechst33342染色,另一组同时加入拮抗剂维拉帕米,通过流式细胞仪对此株细胞进行初步的SP细胞亚群分析。结果:1.体外培养细胞生长稳定,细胞形态学、增殖动力学及浸润性生长结果表明该细胞系符合恶性细胞特征,细胞倍增时间为35.6h;细胞克隆形成率为36.3%;染色体数目分布在61~72之间,众数为64~69;多肿瘤标志物检测得:培养细胞裂解液:CA125 390.12↑(参考值:<35KU/L);CA15-3 86.35↑(参考值:<35 KU/L),培养细胞的上清液:CA125 43.08↑(参考值:<35KU/L);细胞系未见支原体污染。2.细胞的SP亚群的初步分析结果:对此株细胞SP细胞亚群含量分析比例约为14.9%,经维拉帕米阻断后,SP细胞比例明显减少至2.0%。结论:1.该细胞系符合建系标准,其生物学特性研究内容及检测手段较为全面,是一株新建的人肺腺癌细胞系,现命名为XLA-0610(Xuanwei LungAdenocarcinoma Cancer-0610)。可以为肺癌的进一步研究提供一良好的实验模型。2.通过对XLA-0610的SP细胞亚群的初步分析得出以下结论:此株细胞确实存在SP细胞亚群,且比例约为14.9%,经维拉帕米阻断后,SP细胞比例明显减少至2.0%,与未阻断组有显著性差异。提示肺癌干细胞的存在。肺癌的SP亚群的初步分析为肺癌的诊断、鉴定和纯化CSC提供一定的科学参考价值。
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