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背景人类T细胞白血病1型病毒(HTLV-1)是一种感染CD4+、细胞和树突状细胞的逆转录病毒,它是成人T细胞白血病(ATL)的病原体。HTLV-1的病毒蛋白Tax能够利用多种细胞机制和信号途径调节细胞性状转化和病毒复制,其中,Tax诱导NF-κB通路的持续激活被认为是导致ATL的主要原因。Bcl-3是IκB家族中的分子,它能够促进或抑制NF-κB依赖的基因的转录；在很多HTLV-1感染细胞系和ATL细胞中均发现Bcl-3表达量增高,但Bcl-3在HTLV-1致病过程中的作用机制仍不明确。目的研究在HTLV-1感染的细胞中沉默Bcl-3对细胞生长增殖,DNA损伤以及NF-κB活性的影响。方法1.RT-PCR与Western blot:培养MT2、Jurkat、IM9、THP-1、MT4五种细胞系,检测Bcl-3mRNA与蛋白质的表达量；在MT2细胞中转染Bcl-3shRNA,检测Bcl-3mRNA与蛋白质的表达情况；2.免疫荧光检测：分别在Tax转染的Jurkat细胞系以及持续表达Tax的TaxP细胞系中观察Bcl-3与P65的核转位情况；3.彗星实验：在MT2细胞中转染Bcl-3shRNA,检测其对细胞DNA损伤的影响；4.MTT检测：在MT2细胞中转染Bcl-3shRNA质粒,检测其对细胞生长的影响；5.荧光素酶活性检测：将pNF-κB-luc质粒与Bcl-3shRNA质粒共转染[axN与TaxP细胞,观察沉默Bcl-3对NF-κB活性的影响。结果1.实时定量PCR和Western blot检测发现Bcl-3的mRNA及蛋白表达量在HTLV-1感染的细胞系高于HTLV-1未感染的细胞系；2.免疫荧光发现在Tax持续表达的TaxP细胞中能观察到P65的核转移；3.免疫荧光发现在转染Tax的Jurkat细胞中能观察到Bcl-3表达及核转移的增加；4.实时定量PCR和Western blot检测发现在MT2细胞中,Bcl-3shRNA能够在mRNA水平及蛋白水平显著抑制Bcl-3表达；5.MTT法检测到在HTLV-1感染的细胞系转染Bcl-3shRNA能够抑制细胞生长；6.彗星实验检测到在HTLV-1感染的细胞系转染Bcl-3shRNA能够引起细胞DNA损伤；7.荧光素酶报告检测法检测到在HTLV-1感染的细胞系转染Bcl-3shRNA能够抑制NF-κB的活性。结论在HTLV-1感染细胞中沉默Bcl-3可抑制细胞生长、诱导DNA损伤。