miR-140-5p抑制胶质瘤细胞株U251、U87增殖和侵袭性的实验研究

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第一部分mi R-140-5p在人脑胶质瘤组织细胞中的表达特性的研究目的:通过体外研究mi R-140-5p在正常脑组织及人脑胶质瘤组织细胞中的表达情况,来探讨其对胶质瘤细胞的生长发育是否有意义,为进一步研究其在胶质瘤中的功能奠定基础。方法:收集苏州大学附属第一人民医院神经外科手术切除的胶质瘤组织标本,培养胶质瘤细胞株U251、U87MG、SHG44等,采用Trizol法提取各组织标本及细胞株中的总RNA,应用Real-time PCR检测mi R-140-5p在胶质瘤组织中和细胞株中的表达情况。结果:mi R-140-5p在正常脑组织细胞中的表达量明显高于人脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞株(P<0.01),且在胶质瘤组织标本中,病理分级越高,mi R-140-5p的表大量越低(P<0.05)。结论:mi R-140-5p在胶质瘤组织细胞中低表达,其可能在胶质瘤细胞的生长、侵袭中发挥着一定大的作用,值得进一步深入研究。第二部分mi R-140-5p抑制胶质瘤细胞的增值和侵袭并诱导其凋亡的研究目的:研究mi R-140-5p对胶质瘤细胞株的增值、侵袭以及凋亡的影响,为胶质瘤的治疗提供理论依据。方法:用脂质体将mi R-140-5p mimics转染至U251与U87MG细胞,同时设立空白及阴性对照组,实时荧光定量PCR检测转染前后mi R-140-5p在细胞中的表达水平。应用荧光显微镜观察脂质体转染效率,CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期与凋亡;划痕实验检测细胞迁移能力;transwell实验判断U251、U87MG的侵袭能力。结果:U251和U87MG细胞转染mi R-140-5p mimics后细胞的增殖、迁移与侵袭能力明显受到抑制(P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期,S期细胞减少。转染mi R-140-5p mimics后的胶质瘤细胞株的凋亡率明显升高(P<0.05)。结论:过表达mi R-140-5p可以抑制胶质瘤细胞株U251和U87MG的增殖,阻滞细胞周期,促使其细胞凋亡,并可有效抑制其侵袭力。
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