动物脑内酸性肽的鉴别和大鼠脑内含量的分析

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目的:鉴定酸性肽(acidic peptide,AP)在动物脑中是否普遍存在,测定大鼠脑内酸性肽和谷氨酸(glutamic acid,Glu)的含量,并探讨外源性酸性肽对大鼠内源性酸性肽及谷氨酸含量的影响。 方法:用纸电泳法(300V,1h)分离定位marker,此marker包括谷氨酸、酸性肽和谷胱甘肽三种标准小肽或氨基酸,然后用此marker鉴别牛、羊、鸡、鸭、兔、大鼠等多种动物脑中AP的存在。用标准谷氨酸、酸性肽和谷胱甘肽配成浓度分别为0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml、3.0mg/ml、4.0mg/ml的混合液,每一浓度各取4μl点样,然后进行电泳分离,在烘箱中烘10min,剪下斑点,洗脱液洗脱,分光光度法测定不同浓度的AP和Glu的吸光度值(OD)。重复10次实验。以平均OD值为纵坐标,浓度或含量为横坐标,绘制AP和Glu的标准曲线。将大鼠随机分为6组(每组10只),其中1组为对照组,其余5组按100mg/kg酸性肽灌胃,分别在灌胃后1h、
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