【摘 要】
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目的：制备Tc标记c-myc mRNA反义肽核酸显像探针，观察其在人结肠腺癌LSl74-T细胞荷瘤裸鼠和正常昆明小鼠体内分布情况，并通过反义显像研究Tc标记c-mycmRNA反义肽核酸早期诊断结肠癌的可行性。方法：利用化学合成法在c-myc mRNA反义肽核酸片段GCATCGTCGCGG的5’端连上4个氨基酸(G-(D)-A-G-G-)和1个氨基丁酸(Aba)，再利用配体交换法对c-myc mRN
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目的：
制备<99>Tc标记c-myc mRNA反义肽核酸显像探针，观察其在人结肠腺癌LSl74-T细胞荷瘤裸鼠和正常昆明小鼠体内分布情况，并通过反义显像研究<99>Tc标记c-mycmRNA反义肽核酸早期诊断结肠癌的可行性。
方法：
利用化学合成法在c-myc mRNA反义肽核酸片段GCATCGTCGCGG的5’端连上4个氨基酸(G-(D)-A-G-G-)和1个氨基丁酸(Aba)，再利用配体交换法对c-myc mRNA反义肽核酸行<99>Tc标记。并用同样的方法制备<99>Tc标记c-myc mRNA无义肽核酸GCATGTCTGCGG。并用聚酰胺薄膜层析法和高压液相色谱仪(HPLC)测定其标记率以评价标记物的稳定性。培养大量结肠腺癌LS174-T细胞，在每只BALB/C裸鼠右后肢皮下接种生长状态良好的结肠腺癌LSl74-T细胞，SPF级环境中饲养约10天后，肿瘤直径长至1cm，制备成荷瘤裸鼠模型。将30只荷瘤鼠随机分成2组，每只小鼠尾静脉注射37MBq(1mCi)<99>Tc-反义肽核酸后，分别于1、2、4h各取5只，行SPECT静态显像后，眼眶静脉采血，处死小鼠，测定心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、脑、骨、肌肉、肠道、胃、肿瘤及血液等不同组织的重量和计数及标准源的放射性计数。另一组荷瘤裸鼠注入<99>Tc-无义肽核酸后以同样的方法处理。正常昆明小鼠15只，分别于注入<99>Tc-反义肽核酸37MBq(1mCi)1、2、4h后各取5只小鼠，眼眶静脉采血后处死小鼠，测定不同组织中及标准源的放射性计数。计算每克组织中放射性占总放射性的比值(％ID/g)。计量资料以x±s表示，采用SAS 6.12统计学软件行t检验，P<0.05为差异有显著性。
结果：
反义肽核酸片段即刻标记率为99.7％，4、6、8、10、24、28小时后标记率分别为96.8％、95.3％、93.0％、89.6％、88.7％、84.8％，与血清孵育1、3、5、7、24小时后标记率分别为96.8％、96.6％、91.1％、86.2％、80.7％。经HPLC测定标记物呈单峰。反义肽核酸在荷瘤鼠的肾脏、脾脏中放射性分布最高，其次为肿瘤、肠道和肝脏，其它组织中放射性分布较少。在4h内肿瘤组织放射性逐渐浓聚，4h时分布最多。在1h时反义组肿瘤部位可清晰显像，4h内显像未见明显变化。无义组中肿瘤组织未见明显放射性摄取。反义肽核酸在正常昆明小鼠体内肠道、肾脏和脾脏中分布较多，主要经肾脏通过尿液排出体外，其它组织中分布较少。对<99>Tc标记c-myc mRNA反义和无义肽核酸在荷瘤裸鼠肿瘤组织内相应时间％ID/g值行统计学处理，结果示4h时差异有显著性(t=14.75，P=0.0007)。注射<99>Tc标记c-myc mRNA反义肽核酸1h后反义组与无义组T/N比值分别为5.06±1.35和1.53±0.30，行统计学处理，差异有显著性(t=4.47，P=0.04)。
结论：
<99>Tc标记c-myc mRNA反义肽核酸具有良好的核物理性能和生物学性能，可被高表达c-myc癌基因的结肠癌细胞高度摄取。<99>Tc标记c-myc mRNA反义肽核酸可在荷瘤裸鼠活体内与高表达c-myc基因的人结肠癌LS174-T肿瘤组织发生特异结合，对肿瘤反义显像早期诊断有潜在应用价值，是一种有重要应用前景的放射性药物。
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