顺铂（cis-diamminedichloroplatinum,DDP）是治疗实体瘤最有效的化疗药物之一,然而,DDP在化疗中的应用因其导致的组织毒性,特别是肾毒性的存在而受到限制,顺铂引起的急性肾损伤（Acute kidney injury,AKI）严重影响着患者的化疗效果和生存质量。目前,临床上主要采用血管紧张素转化酶抑制剂和利尿剂缓解顺铂导致的肾毒性,但这些治疗措施会产生其他副作用,而天然药物在防治DDP肾毒性方面显示出独特的安全性和有效性。兰坪虫草（Ophiocordyceps lanpingensis）是分布在云南省西北部横断山区的药食两用真菌。长期以来,当地少数民族将兰坪虫草用于泌尿系统疾病的治疗和保健,尚未发现明显的副作用,安全性和有效性受到认可。但兰坪虫草的药理机制尚不清楚。我们的前期研究发现,多糖可能是兰坪虫草的重要生物活性成分,本研究旨在探讨兰坪虫草中性多糖（neutral polysaccharide of O.lanpingensis,ONP）缓解顺铂诱导的急性肾损伤的作用及其机制。研究内容主要分为以下三个方面:1.兰坪虫草中性多糖的制备及组分分析兰坪虫草菌粉经水提醇沉法得到粗多糖溶液,通过Seavge法除蛋白,经DEAE-阴离子交换柱梯度洗脱,收集蒸馏水洗脱液,冷冻干燥得到ONP。进一步分析ONP的分子量、单糖组分以及官能团结构。结果表明,兰坪虫草中性多糖的平均分子量约6.1×104 Da,ONP主要由甘露糖,葡萄糖,半乳糖和阿拉伯糖组成,单糖摩尔比为21.9:27.5:19.5:31.1。2.兰坪虫草中性多糖对小鼠顺铂诱导急性肾损伤的改善作用准备C57BL/6雄性小鼠90只,随机分为对照组（Control组）,模型组（DDP模型组）,兰坪虫草中性多糖组（ONP组）,兰坪虫草中性多糖低、高剂量组（DDP-ONP-L,DDP-ONP-H）。Control组每天灌胃或腹腔注射0.9%生理盐水,DDP模型组隔天腹腔注射一次顺铂溶液（5.0 mg/kg）,ONP组每天给800 mg/kg ONP,DDP-ONP-L组和DDP-ONP-H组除与模型相同隔天给一次DDP外,ONP剂量分别为每天200 mg/kg和800 mg/kg,实验周期为14天,记录小鼠饮食饮水和体重变化。给药结束后,对肾组织进行H&E染色并通过试剂盒检测小鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、Ca、P含量。结果显示,与Control组相比,DDP模型组小鼠体重明显下降,ONP组小鼠无明显变化,DDP-ONP组小鼠体重缓慢下降,且存活率高达58%;DDP模型组小鼠双肾颜色呈现出灰白色,完全不同于Control组的红褐色,ONP治疗组肾脏颜色较红润,DDP-ONP-H组小鼠肾脏颜色接近Control组。H&E染色结果表明,ONP能减轻DDP导致的肾小管细胞坏死。模型组中BUN、CRE和P的含量分别升高了4倍,2倍和1倍,而Ca含量下降约50%。与模型组相比,给予ONP的组,其血清CRE、BUN和P的含量显著降低,Ca含量升高。其中,ONP高剂量组抑制肾毒性效果较好,主要血清生化指标趋近于正常值。以上结果证明,给予ONP确实可以减轻DDP引起的肾脏损伤。3.兰坪虫草中性多糖缓解顺铂肾毒性的作用机制本研究检测小鼠肾组织MDA、SOD、GSH-PX的含量;使用小鼠RAW264.7细胞,在体外探讨了ONP的抗炎活性;并进一步基于动物实验,用实时定量PCR检测肾组织炎症信号通路相关因子TNF-α、IL-1β、IL-10的m RNA表达水平;用蛋白免疫印迹法检测炎症相关蛋白NOX-4、TNF-α、IL-1β的表达量,以及细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、JNK、p-JNK、p38、p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、Caspase3、Cleaved Caspase-3、Caspase 8、Caspase 9的表达量;用TUNEL染色法观察肾细胞凋亡情况。结果表明,ONP可以降低DDP诱导的肾脏组织氧化应激水平,增加抗氧化酶（SOD和GSH-PX）含量,降低MDA含量以及NOX-4的表达水平。在体外,ONP通过升高IL-10的表达水平抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的炎症反应;在体内,ONP也能够升高IL-10的表达,进而抑制DDP诱导的肾组织促炎因子TNF-α和IL-1β的表达,缓解肾脏组织的炎症反应;与此同时,ONP通过抑制MAPK的激活,降低Bax和Caspase家族蛋白的表达,升高Bcl-2蛋白的表达,进而缓解DDP诱导的肾脏细胞凋亡。