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目的：观察TⅢmRNA及TH1蛋白在小鼠睾丸发育过程中的表达变化，探讨A-Raf的结合蛋白THl在睾丸发育过程中的生物学作用。
方法：提取小鼠生后睾丸发育过程中不同时间点的mRNA及蛋白，首先用组织免疫共沉淀的方法验证THl和A．Raf在生理状态下也是共结合蛋白；用荧光PCR法检测发育睾丸mRNA水平的变化；WesternB1otting检测THl在发育过程中蛋白的变化；通过免疫组织化学方法检测THl蛋白在小鼠睾丸切片中的时间和空间的表达样式。免疫荧光方法检测THl和A-Raf的细胞分布及共定位情况。
结果：
(1)运用组织免疫共沉淀方法证明在小鼠睾丸中TH1也作为A-Raf的结合伴侣而存在。
(2)荧光定量PCR试验结合统计分析结果显示，TH1mRNA在睾丸发育过程中并不发生显著变化。
(3)WestemBlotting结果显示讯1蛋白在小鼠生后4周，6周睾丸中的表达量比小鼠生后1，2，8，1O周睾丸中的蛋白表达量低。
(4)免疫组织化学的方法检测THl在睾丸中的分布，THl在生精小管中的分布发生变化，早期未成年的小鼠中，THl的阳性信号出现在初级精母细胞、支持细胞中；在成熟小鼠的睾丸切片，THl的阳性信号仅分布在精原细胞中。在小鼠生后的睾丸发育过程中THl蛋白均在睾丸的间质细胞(Leydigcells)中存在。
(5)为确定THl在Leydig细胞中的细胞内分布，提取大鼠原代睾丸间质细胞进行体外培养，用免疫荧光方法检测显示THl主要在胞浆中分布。
(6)小鼠睾丸间质细胞的肿瘤细胞(mLTCcells)与成熟小鼠睾丸组织切片的免疫荧光显示出THl和A-Raf在Leydig细胞中共定位。
结论：Ⅲ1作为A-Raf在小鼠生后睾丸发育过程中的结合蛋白，在发育过程中THl蛋白在时间和空间的分布发生变化，由此推测THl可能在小鼠睾丸发育和精子的形成过程中发挥作用。