健脑益智胶囊对TBI大鼠损伤脑组织微血管再生影响的实验研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuhuanqw
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目的:本研究釆用电子颅脑损伤仪(eCCI)制作颅脑损伤(TBI)大鼠模型,通过观察不同干预条件下不同组别的颅脑损伤大鼠客观反应情况(精神状态、进食量、行为活动度)、空间辨别性学习和记忆能力改变以及检测损伤脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)的表达水平,进一步探讨基于“豁痰化瘀利水法”的健脑益智胶囊对TBI大鼠损伤脑组织微血管再生的影响。  方法:将健康SD大鼠随机编号后分为4大组,分别为A组(假手术组)、B组(模型组)、C组(脑复康组)、D组(健脑益智胶囊组)。每组按照采集脑组织标本的时间点分为4个亚组(即A1、A2、A3、A4;B1、B2、B3、B4;C1、C2、C3、C4;D1、D2、D3、D4),每组6只大鼠。除A组外其余各组均采用eCCI造模,A组:开颅暴露硬脑膜后将头皮缝合,给予常规喂养;B组:造模后常规喂养,同时给予生理盐水灌胃,不予特殊药物治疗;C组:造模后常规喂养,同时给予脑复康治疗,脑复康片配置成规格为0.09g/ml混悬液,经灌胃途径给药,单次给药剂量为1.2g/Kg,3次/日;D组:造模后常规喂养,同时给予健脑益智胶囊治疗,健脑益智胶囊配置成规格为0.75g/ml混悬液,经灌胃途径给药,单次给药剂量1.5g/Kg,3次/日。分别观察、记录造模前及给予相应处理后第1、3、5、7天大鼠客观反应情况(精神状态、进食量、行为活动度)及空间辨别性学习和记忆能力等行为学变化(运用水迷宫实验观察、记录、分析),并按规定时间点即分别在喂养第1、3、5、7天随机处死相应组别大鼠,采集脑组织标本并对损伤脑组织进行VEGF和ES免疫组化分析。  结果:本实验造模成功率为73%,按照规定的打击速度(5m/s)和打击深度(3mm),所有模型大鼠都属于中重型颅脑损伤。造模后各组大鼠在造模后第1天均出现一般状态差的表现,且 B、C、D组明显;第3、5、7天各组表现都较前有所进步;治疗第7天,D组大鼠的精神状态、进食量和活动度明显优于B组和C组。造模后各组大鼠在各时间点逃避潜伏时间明显长于造模前,穿台次数明显少于造模前,差异有统计学意义(P<0.05),造模后B组大鼠在第3、5、7天逃避潜伏时间明显长于D组和C组,穿台次数明显少于D组和C组。数据结果分析表明:大鼠造模成功后,B组:VEGF在第1d即有显著表达,第3d达高峰,ES在第1d无明显变化,第3d蛋白表达显著升高,并在随后第5、7d逐渐升高。C组:VEGF在第1d即有显著表达,第5d达高峰,在第5、7d的阳性表达较B组升高明显,差别有统计学意义;ES在第1d无明显变化,第3d表达显著增高,在第5、7d较B组ES表达显著降低。D组:VEGF在第1d即有显著表达,并在随后3、5、7d逐渐升高,第3、5、7d阳性表达较B组有统计学意义,第7d阳性表达较C组有统计学意义;ES在第1d无明显变化,第3d表达显著增高,但较B组、C组下降,并在随后3、5、7d逐渐降低,在第5、7d阳性表达较B组有统计学意义,在第7d阳性表达较C组有统计学意义。  结论:  1.VEGF在损伤脑组织中第1d即有显著表达,第3d达高峰,第5、7d阳性表达下降但仍显著升高;ES在损伤脑组织中第1d无明显变化,第3d蛋白阳性表达显著升高,并在随后的第5、7d逐渐升高;  2.健脑益智胶囊可以使损伤脑组织VEGF表达增高而降低ES的表达,具有促进损伤脑组织微血管的再生,改善损伤脑组织缺血、缺氧的作用,并且较脑复康微血管再生作用更强。
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