超临界CO2萃取—超滤浓缩技术提取分离鹿茸中有效成分的研究

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鹿茸是传统名贵中药,具有温肾壮阳、益精补血、强健筋骨等功效。鹿茸中含有多种重要的活性成分,其中次黄嘌呤等生物碱基、甾体化合物、磷脂、胆固醇等具有抑制单胺氧化酶(MAO)的抗衰老作用;胰岛素样生长因子-1(IGF-1)可促进生长发育,尤其对糖尿病及其并发症有特殊的疗效。因此采用先进技术提取分离鹿茸中的有效部位对科学利用中国珍贵中药鹿茸资源及促进中药现代化具有重要意义。本文在课题组前期研究的基础上,基于鹿茸综合利用的角度,首次以鹿茸冻干粉为原料,考察了超临界CO2萃取技术提取鹿茸中MAO抑制剂的工艺条件,优化结果表明,采用萃取压力35MPa和萃取温度35℃的工艺条件,MAO抑制剂提取率可以达到3.92%。萃取物对MAO-B活性具有明显的抑制作用,随萃取物浓度增大,抑制作用增强,呈明显的量效关系。在优化条件下得到的萃取物,当其磷酸盐溶液浓度为238.15 mg/L时,对MAO-B的抑制作用达到94.87%;而对MAO-A的抑制作用只有18.92%;表现出萃取物对MAO抑制具有一定的选择性。利用GC-MS法对萃取物中的化学组成进行了分析,结果表明,萃取物中含有29种具有重要生物活性的饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、甾体化合物和胆固醇等物质。本文还以超临界萃余物为原料,运用碱液超声法提取其中的IGF-1和蛋白质,结果表明,采用萃取压力35MPa、萃取温度不超过40℃的工艺条件,萃余物中IGF-1和蛋白质提取率较高。在上述优化条件下得到的萃余物,IGF-1提取率可以达到20.86μg/g,蛋白质提取率达到130.73mg/g。与鹿茸冻干粉直接进行碱液超声提取相比,用超临界萃余物作原料对IGF-1和蛋白质的提取效果更好。采用超滤技术对IGF-1的超滤浓缩工艺进行了考察,以PES(聚醚砜)膜和改性PES膜进行对比实验,通过考察截留分子量、压力、pH、浓缩倍数等因素对鹿茸冻干粉超声提取液超滤浓缩过程的影响,得出适宜的工艺条件,在此条件下,PES膜IGF-1回收率达到68.32%,蛋白质回收率达到69.20%;改性PES膜IGF-1回收率达到57.17%,蛋白质回收率达到87.43%。采用四种不同的方法对超滤膜的清洗方法进行了考察,结果表明,超滤膜在4‰NaOH-1‰NaClO溶液中浸泡24h,PES膜水通量恢复率达到98.65%,改性PES膜水通量恢复率达到93.75%,膜通量接近完全恢复。
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