鹅肥肝是由短期(3-4周)人工填饲高能日粮所诱导的,以在肝脏中沉积大量脂肪为特征的生理性脂肪肝。有趣的是,鹅肝脏即使在发生严重脂肪变性时也不发生明显的病理性变化,表明鹅肥肝在形成过程中存在某种特殊的耐受机制。揭示这种耐受机制或为提高鹅肥肝的产量与质量提供新的思路。有研究表明,在人和啮齿动物脂肪性肝炎的形成过程中伴有补体系统的高度激活,补体系统核心组分C3/C5基因的敲除可以有效缓解酒精或高脂日粮引起的肝脏脂肪变性和炎症反应。相反,鹅肥肝补体系统整体上受到抑制,提示补体系统可能与鹅肥肝的耐受机制相关。本研究围绕补体C3基因这一补体系统中的核心组分展开如下研究:采用RT-PCR和Western Blot技术检测填饲对能量代谢相关组织(肝脏、肌肉和脂肪组织)中补体C3基因表达的影响,以及肥肝形成过程中肝脏补体C3基因表达的变化规律;分离和培养鹅和小鼠原代肝细胞,研究脂肪肝形成相关因子(葡萄糖、脂肪酸和胰岛素)对鹅和小鼠原代肝细胞中补体C3基因表达的影响;构建补体C3基因过表达载体并转染鹅原代肝细胞,利用RNA-seq技术检测过表达后的差异表达基因,并对差异基因进行GO和KEGG通路分析,以阐明补体C3基因在鹅肥肝中的作用。主要研究结果如下:1.填饲19天鹅肝脏中补体C3基因的mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照鹅(P<0.05)。2.脂肪肝形成相关因子处理原代肝细胞时,RT-PCR技术检测发现,与对照组相比,200 nM胰岛素对鹅原代肝细胞中补体C3基因的表达有显著抑制作用(P<0.05);不同浓度(0.125 mM、0.25 mM)的油酸也可使鹅原代肝细胞中补体C3基因的表达水平下调,且0.125 mM的油酸处理达到显著水平(P<0.05),这与小鼠原代肝细胞中的表达相反。然而,不同浓度葡萄糖和棕榈酸处理都不会引起鹅和小鼠原代肝细胞补体C3基因表达水平的变化(P>0.05)。3.在鹅原代肝细胞中,转染补体C3基因过表达载体和空载体,利用RNA-seq技术检测过表达后的差异表达基因,共筛选到1123个差异基因,其中557个基因表达上调,566个基因表达下调。对差异基因进行GO和KEGG通路分析,发现差异基因主要富集于免疫炎症相关通路(特别是NOD样受体信号通路)、糖脂代谢和细胞死亡等相关通路,其中IRF7基因和KRAS基因在鹅肥肝形成中可能受补体C3基因的调控。综上所述,填饲可以导致鹅肥肝形成过程中补体C3基因表达水平降低,这可能与鹅肥肝形成过程中高血脂和高胰岛素血症有关。补体C3基因可能通过脂肪合成、细胞生长和免疫炎症反应相关信号通路参与鹅肥肝的形成,特别是可能通过NOD样受体信号通路抑制鹅肥肝中炎症的发生,从而增强鹅肥肝对严重脂肪变性的耐受能力。