目的:　　TFF3(Trefoil Factor Family3)三叶因子3，是三叶肽家族的成员之一。其分子结构中含有6个高度保守的半胱氨酸残基，由3个分子内稳定的二硫键连接，形成三叶状结构域，因此得名。TFF3在生理状态下，参与修复胃肠粘膜的损伤，近些年研究表明:血清中TFF3的含量具有作为临床对胃癌、肺癌等肿瘤评估及患者预后标志物的转化前景。虽然有研究报道TFF3高表达状态，与胃肠道肿瘤、乳腺癌、食道癌等肿瘤发生发展相关，但TFF3参与调节胶质瘤的生物学行为的分子机制尚无报道。　　本研究以胶质瘤细胞系及人胶质瘤标本为切入点，确认TFF3在胶质瘤中高表达，并通过敲减TFF3证实其功能。随后，对其上下游调控机制进行探讨。本研究旨在探索胶质瘤细胞中TFF3高表达的生物学意义，为临床胶质瘤治疗提供具有潜在转化意义新靶点。　　方法:　　1.构建敲减TFF3、HIF-1α载体质粒，慢病毒介导转染胶质瘤细胞系，利用嘌呤霉素抗性筛选稳转细胞株。　　2.Western Blot验证TFF3与HIF-1α在胶质瘤细胞及组织标本中蛋白表达水平。　　3.Transwell小室迁移实验观察敲减TFF3及HIF-1α后胶质瘤细胞迁移能力变化。　　4.Transwell小室包备细胞外基质胶侵袭实验，观察敲减TFF3及HIF-1α后胶质瘤细胞突破基质胶侵袭转移能力变化。　　5.免疫组织化学染色观察TFF3及HIF-1α在胶质瘤患者组织标本中表达情况。　　6.卡方检验探究TFF3与HIF-1α在胶质瘤标本中免疫组化染色评分相关性分析。　　7.组织荧光染色TFF3及HIF-1α，利用共聚焦显微镜观察二者共定位情况。　　8.双荧光素酶报告基因实验，检测敲减TFF3后，转录因子HIF-1α的转录活性变化。　　9.免疫共沉淀技术，检测TFF3与HIF-1α在体相互作用情况。　　10.实时荧光定量PCR检测TFF3在胶质瘤细胞系中以及肿瘤标本中表达情况。　　11.BrdU掺入实验检测敲减TFF3及HIF-1α后，胶质瘤稳转细胞系增殖率的变化。　　12.流式细胞术检测敲减TFF3及HIF-1α后，胶质瘤细胞系凋亡率变化。　　13.裸鼠皮下成瘤实验验证敲减TFF3及HIF-1α后，细胞在体增殖及肿瘤体积变化。　　14.Kaplan-Meier检验分析TFF3表达与患者及颅内原位荷瘤小鼠的中位生存期变化。　　结果:　　1.TFF3在胶质瘤患者组织标本及胶质瘤细胞系中，蛋白表达升高。　　2.TFF3的mRNA在胶质瘤患者组织标本及胶质瘤细胞系中表达升高。　　3.TFF3表达高的胶质瘤患者生存期较TFF3低表达患者短。　　4.TFF3促进胶质瘤细胞增殖、侵袭转移，抑制其凋亡。　　5.HIF-1α在胶质瘤患者组织标本及胶质瘤细胞系中表达上调。　　6.TFF3与HIF-1α表达呈正相关。　　7.TFF3与HIF-1α在胶质瘤细胞系及组织标本中存在共定位。　　8.TFF3蛋白与HIF-1α蛋白在体内存在互相作用。　　9.TFF3上调HIF-1α表达，并增强其转录活性。　　10.敲低TFF3的胶质瘤细胞系，在小鼠颅内成瘤后，小鼠的生存期比对照组显著延长。　　结论:　　在胶质瘤中，TFF3可促进肿瘤细胞生长、侵袭转移并抑制其凋亡。TFF3在常氧状态下，与HIF-1α存在相互作用，调节HIF-1α表达及转录活性，从而发挥促进肿瘤进展的生物学作用。在体实验中，敲减TFF3后，荷瘤小鼠的生存期显著延长。综上所述，TFF3具有作为胶质瘤治疗靶点的转化前景。