【摘 要】
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该研究选取油松(Pinus tabulaeformis)作为研究对象,从辽宁省具有不同生境特点的地区-东南部的凤凰山和西北部的凌源采集植物组织,研究油松植物不同组织中内生真菌的丰度、多
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该研究选取油松(Pinus tabulaeformis)作为研究对象,从辽宁省具有不同生境特点的地区-东南部的凤凰山和西北部的凌源采集植物组织,研究油松植物不同组织中内生真菌的丰度、多样性以及侵染特点,揭示不同生境对内生真菌群落组成和分布的影响.该研究从两个样地分别随机选取30株油松,而且从每株植物上选取一个健康树枝,将枝条按组织分为树叶、枝条树皮和木芯三部分,然后将每一部分切成约5mm的组织块进行内生真菌分离.从4320个植物组织块中分离到2065株真菌,1860株可以产生孢子,占分离菌株总数的89﹪,205株(11﹪)不产孢子.鉴定到9属21个分类单元,其中获得4个中国新纪录种—Pestalotiopsis citrina,Phomopsis archeri,Seimatosporium lonicerae,Sporormiella minimoides.虽然我们采用不同的培养基与培养条件,以促进菌株的产孢,但是仍有约11﹪的菌株不能形成产孢结构和孢子,所以这部分内生真菌就不能用经典的形态学方法确定它们的分类地位.为了确定它们在真菌界的系统位置,我们通过研究真菌rDNA中特定基因序列来反映它们的系统发育关系.按照不产孢菌株的培养特征,把它们分为74个形态型类群,对每个形态型的代表菌株进行ITS区(5.8S基因和ITS1、2)PCR扩增与测序,然后结合不同形态型菌株与参考菌种序列碱基相似性和系统发育关系分析,确定它们的分类地位.研究结果表明,在74个形态型菌株中,2个形态型菌株鉴定到种,62株鉴定到属,6株放到科,4株放到目;这74个形态型菌株划分为64个分类单元.在该次研究中,我们还对分离的45株Epicoccum菌株进行形态和分子鉴定,结果表明虽然不同菌株之间的形态特征有非常大的变化,但是ITS序列分析证明它们同为一个种Epicoccum nigrum,这从分子水平上验证了前人提出的在Epicoccum菌种的鉴定中形态学特征的不可靠性.
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