中华猕猴桃果实化学成分及生物活性研究

来源 :安徽中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:zhulimin520
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目的:对中华猕猴桃果实的化学成分以及其中水溶性多糖进行提取、分离纯化,并进行生物活性的初步研究;通过辅料和工艺筛选,将中华猕猴桃多糖制成颗粒剂,建立其质量控制方法,为实现后续的猕猴桃产业化生产提供理论基础。方法:采用中药化学成分预试验的方法对中华猕猴桃果实中的化学成分进行初步探索,在其基础上综合运用硅胶、Sephadex LH-20、反相ODS等柱色谱、高效液相制备色谱等多种分离手段,对中华猕猴桃果汁的乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,并通过理化性质和现代波谱技术对各单体化合物进行结构鉴定;采用苯酚-浓硫酸法对多糖的含量进行测定,再采用DPPH法以及秀丽隐杆线虫进行多糖抗氧化以及抗衰老的活性研究,再综合运用DEAE Cellouse-52、Sephadex G-150等材料进行多糖的分离纯化,并采用HPGPC法测定纯化后的均一多糖的分子量。在此基础上,采用单因素试验法,以多糖提取率为指标,优选出多糖的最佳提取工艺,综合考察外观性状、吸湿率以及成型率,筛选出制备多糖颗粒剂的最佳辅料及成型工艺,并对制得的多糖颗粒剂的粒度、水分、溶化性进行检查,并以多糖含量为指标,建立中华猕猴桃多糖颗粒剂的质量评价方法。结果:通过中药化学成分预试验,提示中华猕猴桃果实中可能含有氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、苷类、皂苷、有机酸、黄酮类、酚类及鞣质、甾体、三萜类等化学成分,并分离得到10个单体化合物,鉴定了其中的8个,分别鉴定为2α,3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(AC-1)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸(AC-2)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(AC-3)、3β-乙酰氧基-12-烯-28-乌苏酸(AC-4)、熊果酸(AC-6)、齐墩果酸(AC-7)、β-谷甾醇(AC-9)、胡萝卜苷(AC-10);从其水提液中提取出的水溶性多糖,初步纯化后,多糖平均含量达到74.54%;通过DPPH以及秀丽隐杆线虫的实验研究,提示中华猕猴桃多糖具有清除DPPH自由基以及抗衰老的活性,并分离得到ACP-2、ACP-3两个均一多糖组分,根据HPGPC测定结果计算得到ACP-2、ACP-3的分子量分别为1079 k Da、1031 k Da;筛选出制颗粒的辅料为甘露醇,并且加入25%的90%乙醇时制粒情况较好,颗粒成型率较高。质量研究表明,中华猕猴桃多糖颗粒的粒度、水分和溶化性均符合规定,其中中华猕猴桃多糖的平均含量为30.04%。结论:化合物AC-1、AC-2、AC-3、AC-4为首次从中华猕猴桃果实中分离得到;提取出的水溶性多糖平均含量为74.54%>50%,说明可以作为有效部位利用;并且中华猕猴桃多糖具有一定的抗氧化及抗衰老活性;优选的中华猕猴桃多糖颗粒处方、工艺可行,建立的质量控制方法可行。
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