双酚A、雌激素受体基因多态性对女性职业暴露人群生殖功能影响研究

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【研究背景】双酚A(Bisphenol A ,BPA)是合成树脂的主要单体材料,被广泛应用于人类日常生活用品如婴儿奶瓶、塑料杯等的制造。大量研究表明:双酚A具有强抗雄激素作用及弱雌激素样作用,被高度怀疑是人类内分泌干扰物。但目前几乎没有研究证据支持双酚A暴露影响人类生殖功能。近年来,关于双酚A对生殖功能影响的研究已经从传统形态学和性激素水平的生殖结局指标向与生长发育有关的调控基因和大分子蛋白指标转变,其中基因多态性是目前国内外研究的热点。基因组中某些位点多态会导致不同个体对某些疾病易感性的不同。因此研究双酚A暴露的影响时,仅考虑双酚A的毒性还很难客观的评估其对人体的损害效应。目前雌激素相关基因位点多态与双酚A的联合作用关系还没有文献报道,因此我们假设雌激素受体基因多态性可能在双酚A对生殖功能的影响中发挥作用。【目的】研究双酚A暴露与雌激素受体基因多态对女性生殖功能的联合作用。【方法】采用流行病学回顾性队列研究的方法,于2006年10月至2008年4月在浙江省宁波市、湖南省岳阳市、江苏省无锡市、宜兴市四个研究中心进行,匹配条件是年龄、工龄,共获得样本432例(双酚A暴露女工125例,对照307例)。采用结构式调查问卷调查女工月经史、生育史、性生活史、工作暴露史等资料,同时对女工子代进行体格检查及发育状况调查。对女工收集5ml静脉血,PCR-RFLP及荧光定量PCR-分子信标技术检测ER PvuII、ER XbaI、ER Codon594及ER Codon325的基因分型。采用的主要统计方法为t检验、χ2检验、Hardy-Weinberg平衡检验、协方差分析、Cochran-Armitage趋势检验及Rothman危险因素联合作用相加效应模型等。统计软件为SAS 8.1。【结果】(1)最近6个月月经周期最长天数双酚A暴露组(30.47±5.40)小于对照组(31.89±6.54),差别有统计学意义(t=-2.12, P =0.0353)。未发现月经周期是否规则、月经周期平均天数、最长月经周期天数、平均行经天数四个指标及性生活中的满意度、性享受程度、性兴奋程度、性高潮程度、性功能综合指标以及性幻想频率(次/月)在暴露组与对照组间的差异。(2)男性子代在开始长阴毛、腋毛及发育至Tanner 1期、Tanner 2期、Tanner 3期、Tanner 4期的年龄暴露组均晚于对照组。而女性子代乳房发育及发育至Tanner 5期的年龄暴露组早于对照组。(3)四个位点各基因型在中国女性人群中的分布频率为:ER PvuII位点:pp型:38.93%,Pp型:44.76%,PP型:16.32%;ER XbaI位点:xx型:45.45%,Xx型:41.49%,XX型:13.05%;ER Codon594位点:GG型:60.84%,GA型:32.87%,AA型:6.29%;ER Codon325位点CC型:24.82%,CG型:55.19%,GG型:21.99%。均符合H-W平衡。ER PvuII、ER XbaI及ER Codon325多态性分布存在种族性差异,未发现ER Codon594在不同种族人群间的差异。(4)双酚A暴露组与对照组ER PvuII、ER XbaI、ER Codon594、ER Codon325四个位点各基因型在月经周期、性功能各指标不同组别间的分布差异无统计学意义。(5)基因与双酚A暴露对月经周期影响的联合作用分析显示:在模型1中,Cochran-Armitage检验发现ER PvuII、ER XbaI位点多态与双酚A暴露对月经周期最长天数变短有联合作用的趋势(P分别为0.0416、0.0155),暴露于双酚A又携带突变基因的RR分别为1.93(95%CI:1.01-3.67)、1.91(95%CI:0.97-3.75)。但Rothman方法未发现基因多态与双酚A暴露有相加效应。在模型2中,Cochran-Armitage检验发现:ER XbaI位点多态与双酚A暴露对月经周期最长天数变短的危险有联合作用的趋势(P=0.0049),既暴露于双酚A又携带突变纯合子人群月经周期最长天数变短的RR为2.12(1.35-3.31)。Rothman方法未发现基因多态与双酚A暴露的联合作用。(6)基因与双酚A暴露对性功能的联合危险度分析显示:在模型1中, Rothman方法计算发现: ER PvuII的Pp或pp基因型与双酚A暴露对性功能减弱有负相加模型效应(S=-0.05,P=0.048),与参照组相比RR值为1.05(95%CI:0.44-2.55)。ER Codon325的CC或GG基因型与双酚A暴露对性生活满意度减弱有负相加模型效应(S=0.21,P=0.01),与参照组相比RR值为1.60(95%CI:0.61-4.23)。但Cochran-Armitage检验未发现基因多态与双酚A暴露有联合作用的趋势。在模型2中,Cochran-Armitage趋势检验发现ER PvuII位点多态与双酚A暴露对性生活中享受程度减弱有联合作用的趋势(P=0.0132),暴露于双酚A又携带pp基因型的RR为4.42(1.25-15.68)。Rothman方法计算四个位点均未发现基因与双酚A暴露对性功能减弱的联合作用。【结论】双酚A职业暴露可能对女性人群生殖功能的影响较弱,对其子代的生长发育可能具有延缓作用。ERα基因多态位点分布频率在不同种族间有一定的差异。ERα基因多态与双酚A暴露可能对女性生殖功能改变呈弱的负相加效应。以上结论尚需大样本流行病学及实验室研究结果来证实。
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