背景:化疗耐药是导致卵巢癌预后差的重要原因。铂类药物进入细胞后与DNA交联导致DNA单链和双链损伤,从而触发凋亡,而DNA损伤修复功能增强是导致卵巢癌铂类耐药的机制之一。PARP1在DNA损伤修复中发挥关键作用,且是let-7e的预测靶点。我们的前期研究发现上调 let-7e能够增加卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,本文旨在研究let-7e是否通过抑制PARP1介导的DNA损伤修复增加卵巢癌的化疗敏感性。方法:原位杂交和免疫组化分别检测let-7e和DNA损伤修复关键蛋白PARP1、BRCA1、Rad51在卵巢癌组织中的表达。采用MTT和克隆形成实验检测卵巢癌细胞的顺铂敏感性。碱性和中性彗星实验、yH2AX免疫荧光检测DNA损伤修复。双荧光素酶报告实验检测let-7e是否靶向作用于PARP1的3’UTR端。采用Fisher确切概率法、生存分析、受试者工作曲线(ROC)、cox和logistics回归模型等统计方法探讨let-7e和PARPl、BRCA1、Rad51的临床意义。结果:原位杂交结果显示let-7e在化疗耐药组织中低表达,进一步证实了 let-7e与化疗耐药相关。碱性和中性彗星实验、γH2AX 免疫荧光显示上调let-7e后,DNA单链和双链损伤修复被抑制,而下调let-7e,DNA修复功能则增强;且let-7e能够负性调控双链修复关键蛋白BRCAl和Rad51的表达。双荧光素酶报告实验证实let-7e能够与PARP1的3’UTR端直接结合,并抑制其表达。对let-7e和PARPl进行同向上调和下调,发现let-7e能够作用于PARP1抑制DNA单链和双链损伤修复,体内外实验证实let-7e对PARPl的靶向调控最终能够增加卵巢癌对顺铂的敏感性。动物实验还发现与PARP1抑制剂类似,let-7e的模拟物agomir 能够增敏顺铂的毒性作用。Fisher确切概率法、Kaplan-meier生存分析,单因素cox和logistics回归分析显示let-7e低表达,PARP1、BRCAl、Rad51高表达与卵巢癌患者化疗耐药及较差的预后相关;ROC曲线结果显示上述4个因子均能较好地预测卵巢癌患者的化疗反应性;多因素cox和logistics回归分析发现仅let-7e能够作为预测卵巢癌患者预后和化疗反应性的独立因子。结论:在卵巢癌中,低表达的let-7e能够通过解除对其靶点PARP1的抑制,增加DNA损伤修复功能,进而导致卵巢癌顺铂耐药;let-7e可发挥与PARP1抑制剂类似的作用,增加卵巢癌对顺铂的敏感性,提示let-7e有望成为逆转卵巢癌顺铂耐药的新靶点。