论文部分内容阅读
目的:探讨由金银花中分离获得的7个咖啡酰奎宁酸类化合物药理活性,筛选出具有保护心肌细胞,抗氧化应激损伤的活性化合物。 方法:1.建立乳鼠心肌细胞氧化应激模型,分别采用缺氧及过氧化氢模型诱导心肌细胞凋亡;2.用MTT法分别测定在两种氧化应激模型条件下,7个咖啡酰奎宁酸类化合物对乳鼠心肌细胞活力的影响:3.选择3,5-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯进行预处理,在缺氧条件下检测心肌细胞ROS水平;4.选择3,5-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯进行预处理,采用H2O2诱导细胞凋亡模型,应用流式细胞仪、TUNEL等实验方法检测细胞凋亡并检测GStotal和GSSH表达水平。 结果:1.MTT分析显示,在7个咖啡酰奎宁酸类化合物中,3,4-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯、3,5-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯能够明显提高H2O2及缺氧损伤的心肌细胞的活力(P<0.01);2.缺氧诱导的心肌细胞凋亡实验中,发现3,5-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯能明显降低ROS水平;3.H2O2诱导心肌细胞凋亡的实验中,应用流式细胞仪和TUNEL试剂盒进行心肌细胞凋亡计数及GSH试剂盒进行检测,与H2O2模型组比较,发现3,5-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯给药组,心肌细胞凋亡率下降(P<0.05),GStotal含量增加(P<0.01),GSSH含量降低(P<0.01)。 结论:由金银花中分离提取的7个咖啡酰奎宁酸类化合物中,二咖啡酰奎宁酸及其甲酯类具有明显的抗氧化应激损伤作用,3,5-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯都明显降低缺氧诱导起的ROS水平升高和H2O2诱导的心肌细胞凋亡,具有心肌细胞保护作用。