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研究背景：
鼻咽癌是我国南方尤其广东省的高发肿瘤之一。EB病毒与鼻咽癌关系密切，尽管EB病毒在鼻咽癌发病过程是否为病因以及具体机制还不是很清楚，但是针对EB病毒的抗原抗体系统检测在临床诊断及筛查方面得到广泛应用。然而，抗体的应用也有其缺陷，如变化落后于体内EB病毒的变化，不能及时反映病情的变化。在鼻咽癌高发现场的前瞻性随访研究发现存在一定比例的人群其抗体不断波动，这种波动的实际意义有必要予以探讨。
血浆游离EBV DNA的研究日趋成熟，目前的研究显示血浆游离EBV DNA在鼻咽癌的分期、疾病鉴别、预后判断、监测治疗后复发与远处转移等方面都具有重要意义，从而成为一个良好的肿瘤标志物。实验技术如荧光定量PCR方法的发展也使得EBV DNA的测定准确快速，可以正确反映鼻咽癌患者病情，正确反映体内EB病毒复制变化的情况。本研究的主要目的是以EBVDNA作为反映体内EB病毒的依据，针对抗体波动的情况，通过重复测定研究对象的血浆EBV DNA及抗体指标，并分析血浆EBV DNA与抗体变化的关系，从而探索抗体波动的原因，同时为干预措施的评价提供参考，还可以探讨EBVDNA在早期筛查的价值。
材料和方法
本研究于2006年8月至2007年3月对广州和四会的部分人群进行血样收集。鼻咽癌病例的收集来自中山大学肿瘤防治中心，对照人群在四会肿瘤研究所收集。所有对象没有经过放化疗处理。每个研究对象前后抽取两次血样，中间相隔时间不少于半个月。血样采集后离心得到血浆和血清，血浆标本送至中山大学达安基因研究部，使用巢氏PCR法检测血浆游离EBV DNA：血清标本送至中山大学肿瘤防治中心，使用免疫酶法检测VCA/IgA、EA/IgA抗体。同时收集研究对象相关资料如性别、年龄、疾病分期等。观察抗体水平波动情况。使用Wilcoxon检验比较各组主要指标平均水平；使用配对秩和检验比较两次测量各指标水平；计算ROC曲线下面积并比较各指标曲线下面积；计算Kappa指数描述各指标前后两次测量的一致性；使用混合效应模型计算各变量个体内相关和个体问相关系数；使用bootstrap方法估计相关系数95﹪置信区间。所有计算均使用SAS9.1完成。
结果：
收集研究对象74人，其中早期鼻咽癌病例8人、晚期病例20人、正常人群30人、抗体阳性人群16人。各组间性别和年龄分布差异没有统计学意义。初次观测病例组血浆EBV DNA以及抗体水平显著高于对照组，晚期期病例组高于早期阳性组。两次测定VCA/IgA和EBV DNA的ROC曲线下面积都达到0.9以上，两者差异没有统计学意义，EA/IgA的曲线下面积略低于0.73，与其他两个指标的差异具有统计学意义。
病例组和对照组在两次观测间抗体水平发生波动，对照组有17.39﹪存在VCh/IgA滴度降低或转阴，8.7﹪存在该抗体升高：4.34﹪存在EA/IgA滴度降低或转阴，VCA/IgA抗体波动比例大于EA/IgA。病例组抗体波动比例高于对照组，高滴度者抗体波动比例大于低滴度者，但大部分人群抗体波动幅度都小于2个滴度。
血浆EBV DNA与抗体存在正相关，计算简单Spearman相关系数，与VCA/IgA相关性在0.6左右，与EA/IgA相关性大于0.4。采用混合效应模型计算两次测量各变量之间个体间相关系数，VCA/IgA与EBVDNA个体间相关系数为0.6311，95﹪CI为0.5060～0.7611，EA/IgA与EBV DNA个体间相关系数为0.4047，95﹪CI为0.2644～0.5971。
抗体与EBV DNA的一致性弱，Kappa值在0.3～0.45之间。抗体变化与EBV DNA变化无统计学关联。EBVDNA与VCA/IgA个体内相关系数为0.0723，95﹪CI为-0.045～0.1485；EBVDNA与EA/IgA个体内相关系数为-0.1441，95﹪CI为-0.2880～0.0375。讨论：
本研究为重复测量研究设计。对74个研究对象前后测定EBV DNA和VCA/IgA、EA/IgA三个指标。发现病例组EBV DNA水平高于对照组，晚期病例组高于早期病例组，验证了EBV DNA的诊断价值，但比较各指标的诊断效能，血浆EBV DNA并不优于抗体指标，提示EBV DNA在早期筛查方面价值没有其在临床诊断和预后判断的价值大。抗体水平在两次测量存在一定比例的波动，对照组VCA/IgA波动的比例大于EA/IgA，但大多数在2个滴度范围内波动，超过2个滴度的波动少见，提示以抗体指标下降作为疗效指标的干预研究对其疗效的定义必须考虑波动幅度的影响。抗体指标与EBV DNA存在正相关，但抗体指标与EBV DNA的一致性差，并且抗体指标和EBV DNA指标的个体内相关系数很低，说明抗体指标变化与EBV DNA变化没有关系，提示抗体水平的波动可能并不代表EB病毒体内复制活跃程度的改变，或者EB病毒抗体和EBVDNA反映EB病毒复制的不同方面，还需要进一步探讨。
本研究在纵向上对EBV DNA和抗体指标变化的相关性进行了分析，不同于以往研究在横断面上分析两者关系。研究结果有一定意义：进一步确证血浆EBV DNA的诊断价值，探讨了该指标在早期筛查的应用意义：有助于我们进一步了解自然人群抗体波动的情况；探讨了病例组和健康人群体内抗体变化的原因，同时为干预研究的评价提供了参考。鉴于本研究时间有限，样本量偏少，有待于进一步扩大样本量，并增加重复测量次数，深入研究。