单细胞凝胶电泳检测洛克沙胂对中国仓鼠肺细胞的DNA损伤

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cr_idealism
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以洛克沙胂为代表的有机胂饲料添加剂具有抗菌、促生长、提高饲料转化率等作用,在畜禽生产中广泛使用。动物机体对洛克沙胂吸收较少,大部分以原型随粪便排泄进入环境。砷是一种公认的致癌物,对细胞DNA有明显的损伤。洛克沙胂毒性虽小,但对DNA的影响及进入环境后对生物的潜在遗传毒性,目前研究报道较少。本文通过单细胞凝胶电泳技术,研究洛克沙胂对中国仓鼠肺细胞的DNA影响,初步探讨洛克沙胂的遗传毒性及对环境生物的潜在风险。单细胞凝胶电泳实验中,试验设计分别为1、10、100、500、1000μg/ml的洛克沙胂以及10μg/ml的亚砷酸钠组,并设空白对照,染毒3、6、12、24、48h后,用改良碱性单细胞凝胶电泳方法,通过CASP软件分析彗星尾部DNA含量、尾力矩、Olive尾力矩三个指标。结果表明,1、10、100、500、1000μg/ml洛克沙胂处理后细胞尾部DNA含量分别从3h的2.02%、4.22%、7.48%、9.60%和11.03%增加到48h的13.87%、15.51%、28.29%、29.39%和35.17%;尾力矩分别从3h的0.12%、0.27%、0.81%、0.95%和1.44%增加到48h的1.84%、3.11%、4.28%、5.06%和7.61%;Olive尾力矩分别从3h的0.27%、0.48%、1.02%、1.23%和1.57%增加到48h的2.06%、2.34%、5.11%、5.58%和8.18%。可以看出,1μg/ml洛克沙胂在暴露12h后可以诱导细胞的DNA损伤(P<0.05);其他洛克沙胂处理组在所有暴露时间内均可引起明显的DNA损伤(P<0.05);500、1000μg/ml洛克沙胂处理引起的细胞损伤与中等浓度的亚砷酸钠相当(P﹥0.05)。洛克沙胂对V79细胞的微核实验表明,除1μg/ml洛克沙胂处理组外,其他洛克沙胂组在暴露12h后均有明显的微核出现率,但对DNA损伤的检出暴露时间长于单细胞凝胶电泳方法。单细胞凝胶电泳实验及微核实验均表明洛克沙胂对V79细胞有DNA损伤作用,且单细胞凝胶电泳技术比微核实验可检测出对细胞的更早期损伤。提示畜禽粪便中洛克沙胂残留进入环境后,可能对环境生物存在着潜在的遗传毒性;单细胞凝胶电泳技术可作为有机胂DNA损伤的有效检测手段。
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