抗生素和激素类药物具有预防、治疗疾病或调节机体生长的作用,因此在畜牧业、水产养殖业中得到广泛应用。其中呋喃唑酮（furazolidone,FZD）是一种广谱的抗生素,用于治疗由细菌和原生动物引起的痢疾、肠炎等疾病,17-β雌二醇（17-βestradiol,E2）是一种内源性雌激素,多用来促进繁殖和生长,但是这些药物会残留在动物体内被其吸收,再通过食物链的蓄积作用进入人体内,影响机体的生长繁殖,甚至对人体有潜在的致畸、致癌作用。因此,构建快速灵敏的检测方法对此类物质进行检测是十分必要的。本研究以FZD和E2作为检测目标物,构建了两种基于比色-催化的免疫层析试纸条（LFIA）检测方法,以实现食品中有害物质的快速灵敏检测。主要研究内容和结果如下:1、基于三级信号放大间接探针免疫层析（TsAIP-LFIA）的建立:首先对合成的普鲁士蓝（PBNPs）进行表征,分别引入羊抗鼠Ig G（GAMA,二抗）和辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠Ig G（GAMA（HRP））,制备了传统探针（PB-m Ab）、间接探针（PB-GAMA-m Ab）和Ts AIP（PB-GAMA（HRP）-m Ab）,并设计了基于三种探针的试纸条进行对比探究。第一阶段利用多个GAMA分子可以与一个m Ab的结合实现信号放大;在第二阶段,利用PBNPs的类过氧化物酶活性催化底物实现进一步的信号放大;最后,在GAMA（HRP）的催化活性下,实现了第三级信号放大。在最佳试验条件下,Ts AIP-LFIA方法催化前的检出限为0.4 ng m L-1,催化后的可视化检测限（v LOD）为1 ng m L-1,计算所得检测限（c LOD）为0.33 ng m L-1。三级信号放大的优势主要体现在检测范围的拓宽,以及对检测抗体用量的降低方面,TsAIP-LFIA方法的检测范围为0–10 ng mL-1,该范围比基于PB-m Ab和PB-GAMA-m Ab探针的试纸条方法分别扩大了1.25倍和2.5倍;每次分析检测抗体的消耗量降低至0.02μg,比另外两个方法消耗量（0.32μg和0.04μg）均有明显降低,从而降低了检测成本。将该试纸条应用于牛奶、猪肉和鸡肉中FZD的残留检测,其在实际样品中的检测灵敏度分别是5 ng m L-1、10 ng g-1、10 ng g-1,回收率在84.3–103.1%之间。此外,由于该试纸条具有双重信号读出方式,能够提高结果的准确性,在实际检测中可根据检测需求的不同选择合适的信号读出方式,从而增加了其在实际样品中的应用潜力。2、基于多功能NiCo2O4（NCO）免疫层析（NCO-LFIA）方法的建立:首先引入非复合多功能纳米材料NCO作为信号标签,通过各个表征证明NCO以及NCO-m Ab探针的成功制备。NCO具有比色、酶活、磁性等特性,与常见的多功能纳米复合材料的多步修饰合成工艺相比,非复合NCO的合成工艺更为简单。该方法可以实现比色和催化信号的双重读数,磁性可以减弱实际食品样品中存在的基质效应。在最佳试验条件下,NCO-LFIA方法在比色和催化模式下的测试范围分别为0–8 ng m L-1和0–30 ng m L-1,相关系数分别为0.9541和0.9962。将该方法应用于猪肉和牛肉的检测,催化后的检测限均为2 ng g-1,回收率在86.2–107.6%范围内,可以满足在食品样品中检测的需求。这种新型多功能非复合材料自身的颜色肉眼可识别,同时具有过氧化物酶活性,应用于LFIA时可实现比色-催化的读出模式,在有害物质检测方面具有广阔的前景。