目 的 本研究的目的是探索DLBCL中PTEN基因突变和蛋白表达情况，以确定PTEN基因是否在DLBCL的发病机制中起一定的作用；比较在DLBCL中PTEN基因与同为肿瘤抑制基因的p53基因在基因突变和蛋白表达等方面的异同，以及它们对DLBCL的临床特征、治疗反应和生存时间等的影响。与IPI比较，价 值如何？本实验还检测淋巴瘤＊ 和 Jurkat细胞株 PTEN基因 DNA、mRNA 的突变和蛋白表达；观察PTEN基因的蛋白表达对环磷酚胺、阿糖胞昔诱导淋 巴瘤＊ 和 JIJrkat细胞凋亡的影响，以了解肿瘤抑制基因 PTEN在环磷酚胺、 阿糖胞昔诱导＊i和Jllrkat淋巴瘤细胞凋亡机制中所起的作用。 方 法 本研究分析暨南大学医学院第一附属医院 1994年到 1999年间，病理组织 学和免疫组织化学证实的DLBCL 60例。病例经以CHOP方案为主的化疗。全 组病例中数年龄48岁，最大年龄74岁，最小8岁，大于60岁的有12例（20刀％）； 男性 45例（乃刀％），女性 15例（25刀％）。按 REAL分类均属 DLBCL；按 NHL 国际工作分型分类，22例为弥漫性混合细胞型，刀例为弥漫性大细胞型，7例 为免疫母细胞型。41 例（68．3O）病人是原发于淋巴结，19例（31．70）是原 发于结外病变。超过 1个部位结外病变的病例有 11例。按 Ann Arbor分期，I 期 7例门．7％），11期 30例（50刀％），Ill期 13例（21．7％），IV期 10例门．7％）。 17例病人的血清 LDH水平超过 500IUI。身体活动能力评分（PS评分），2级ti 以上的18例o0·0％人按PI分组，低度危险组16例p6·7％卜低中度危险组＞18例u0．00人 高中度危险组11例门．3％人 高度危险组15例（25．0％人 全组60例DLBCL病例均用石蜡包埋的肿瘤组织通过免疫组织化学的方 法（LSAB）来检测PTEN蛋白、p53蛋白表达。用聚合酶链反应一单链构象多 形性分析（SSCP－PCR）技术检测PTEN、p53基因。 采用逆转录一聚合酶链反应一单链构象多形性分析（RTFCRSSCP）方法 检测Rat i． Jurkat细胞株的PTEN基因mRNA；以PCR丑SCP检测Ran、Jurkat 细胞的PTEN基因；以间接免疫荧光标记通过流式细胞仪检测Ran、ill．，－Mxat细 胞在环磷酚胺、阿糖胞昔作用前后PTEN蛋白含量的变化；采用姬姆萨染色观 察细胞凋亡的形态学变化；琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的＊＊A断裂：通过 流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析。 结 果 在60例 DLBCL中，共有门 例（18．3o）被检测出发生 PTEN基因突变。 PTEN基因突变病例按患者的年龄、活动能力评分。结外病变的数量、血清LDH 水平、Ann Arbor分期和病理亚型分组中，均无显著性差异。门例基因突变的 患者中6例取得完全缓解，CR率54．5％；而49例无基因突变病例中，CR例数 3 为38例，CR率77．6％，两组比较统计，羚卜斤以著性美异（X’一4．0，P＜0．0引。 复发率无明显差异 以’一0刀3，P＞0刀引。3 年生存率和无病生存率（＊m）亦无 明显差异（log rank一3．55，P＞0．05和 log rank一3．57，P＞0刀5）。 PTEN蛋白低表达 PTEN 士／－）31例（sl．70）：PTEN i白正常表达 PTEN （＋）的29例（48．3O）。Ill－IV期患者的PTEN（土／－）比例（69．6o）比l－11 期的N0．5o）高，在统计学上有显著性意义（X乙8．73，P＜0．05人 e PTEN蛋 白表达情况按患者的年龄、活动能力评分、血槁LDH水平、结外病变的多少分 组。IPI分组和 NHL的病理国际工作分型l。P均无明显差别。PTEN蛋臼低表达 组的CR率为扣．8％（1v31），正常表达组PTEN卜）的CR率达”．7％门6／”）， 两组 CR率比较有明显差别（X‘一15刀2，P、0刀5）；PT’EN蛋臼低表达组的 3年生 存率和无病生存率分别是 24．19o和 17．74o，而 PTEN蛋白正常表达组的则高 达62．400和 59．23O。PT洲蛋白低表达的患者3年生存率和无病生存率均有 显著性降低 （Ic Oank一14．32，P＜0刀5和 IOg rob二25．33，P＜0＊5）。 p53非功自蛋白阳性表达 p53（十）11例 （ 8．3％）；pp3（?