鼠视网膜血管发育中的内皮细胞转型机制

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目的:探讨鼠视网膜血管正常发育过程中血管内皮细胞转型的具体机制。检测细胞间CD31、VE-cadherin,间充质样细胞标志蛋白平滑肌样肌动蛋白(a-SMA)、钙结合样蛋白(FSP-1)及细胞转型调控基因Twist在鼠视网膜血管成熟过程中表达变化情况。方法:对照实验研究将新生C57BL/6J小鼠40只,在生后第1、5、8、17天时各处死小鼠10只,应用荧光素钠灌注视网膜铺片方法观察视网膜血管发育的形态变化,应用视网膜铺片免疫荧光技术观察鼠视网膜发育过程中血小板-内皮细胞粘附分子(PECAM1/CD31)、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin, a-SMA)、成纤维细胞特异性蛋白-1(Fibroblast specific protein, Fsp-1)及Twist表达变化情况;提取全视网膜RNA,应用逆转录聚合酶链反应检测CD31、a-SMA、FSP-1及Twist基因表达变化情况,采用ΔΔCt法计算RQ值,使用SPSS13.0统计学软件进行单因素方差分析,以P<0.05作为差异有统计学意义。结果:视网膜铺片免疫荧光技术结果显示,小鼠CD31在生后第5天时表达较高,第8天和17天保持较低的水平,VE-cadherin在出后呈逐渐上升的趋势,a-SMA和FSP-1表达分别在第1天和第5天较高,但其它时间均为较低水平,Twist表达在第5天较高。RT-PCR检测结果显示各组CD31(F=27.813,P<0.05)、a-SMA(F=19.171,P<0.05)、FSP-1(F=508.791,P<0.05)、Twist(F=27.229,P<0.05)RQ值间比较有统计学意义。结论:在小鼠视网膜血管正常发育过程中可能发生了间充质内皮转型,Twist基因可能参与了这个转型过程。
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