人胃癌组织中microRNA-433表达及其功能的研究

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目的:观察胃肿瘤组织和正常胃组织中microRNA-433分子的表达水平,探讨胃癌细胞中microRNA-433表达调控机制及其对胃癌细胞凋亡的影响。方法:收集华中科技大学同济医学院附属协和医院胃癌患者的手术标本包括癌旁组织,共43例,通过实时定量荧光PCR方法检测胃癌组织和癌旁组织中microRNA-433的表达情况,,根据病例进行临床病理统计学分析;利用不同浓度5-杂氮胞苷(5-Aza-CdR)处理SGC-7901细胞,然后通过实时定量PCR检测microRNA-433的表达,最后使用microRNA-433mimics转染SGC-7901细胞,利用流式细胞术分析其对SGC-7901凋亡的影响。结果:1.实时定量PCR结果显示,胃肿瘤组织中的miRNA-433表达量与正常组织中miRNA-433相比明显减低,其相对表达量为0.623±0.197,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.临床病理资料分析表明,microRNA-433的表达与胃癌的TNM分期明显相关,在Ⅰ,Ⅱ期病人胃癌组织中的表达量较Ⅲ,Ⅳ期胃癌组织中的表达量明显增多,其相对表达量分别为0.701±0.180和0.460±0.115,P值等于0.035,差异具有统计学意义。3正常胃黏膜永生化上皮细胞GES-1中的microRNA-433表达水平相比胃癌细胞SGC-7901中的表达水平明显增多。甲基化转移酶抑制剂5-Aza-CdR促进胃癌细胞SGC-7901中microRNA-433的表达,浓度为1μM,5μM,10μM时microRNA-433表达量分别为1.47±0.13,1.87±0.10,2.55±0.31,呈明显量效递增关系。4. MicroRNA-433mimics转染组胃癌细胞凋亡率为24.4%±1.1%,阴性对照组凋亡效率为3.2%±1.0%,空白对照组为2.5%±1.0%,转染组与对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌组织中microRNA-433表达较癌旁正常组织显著减少,与临床分期明显相关。5-Aza-CdR促进胃肿瘤细胞SGC-7901中的microRNA-433表达,表明其在胃癌组织中下降可能是由于其启动子区域高度甲基化。提高胃癌细胞中microRNA-433的表达可促进肿瘤细胞的凋亡。microRNA-433基因可能作为一种抑癌基因具有抑制胃癌生长的作用。
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