青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究

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青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja]集药用、保健、材用、观赏等多种功效于一体,具有很高的开发价值,但是自然更新困难,开发利用受到严重制约。本课题选择了青钱柳四个种源(其中三个单株)离体胚作为外植体,系统建立了由离体胚培养到生根诱导的整个技术体系,并以子叶作为试料对生根机理进行了探讨。本研究旨在建立快速、高效的青钱柳组培快繁体系,为工厂化育苗提供理论依据。现将本研究主要结论与成果总结如下:(1)比较了不同培养基中离体胚生长情况,结果表明添加蔗糖20g/L的琼脂白培养基显著提高了离体胚的萌发率(82.33%)。此培养条件下种源间离体胚质量差异较大:06庐山1#成苗率最好,为72.66%;06剑河3#和06云南4#其次,成苗率44.00%、39.33%;06鹤峰种源最差,仅17.33%。(2)据离体胚培养的结果和试验基数的要求,选择06庐山1#、06剑河3#、06云南4#做进一步的丛生芽诱导增殖试验。初代与继代培养的结果证实了不同种源长势上的差异。初代培养兼顾丛生芽诱导率与增殖系数,继代培养以增殖系数和苗高作为考察对象。试验结果表明6-BA0.5~1.0mg/L+IBA0.01mg/L是适合初代、继代培养的最佳激素组合。06剑河3#在6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L组合下丛生芽诱导率100.00%,增殖系数6.08,苗高3.87cm;06庐山1#与06云南4#最佳丛生芽诱导率分别为93.33%、63.33%,增殖系数5.22、2.99,苗高3.12cm、3.40cm。(3)选用了稀土硝酸镧和烯效唑进行壮苗培养,以06剑河3#和06庐山1#继代试管苗作为试材,测定了相关生长、生理指标比较壮苗效果。试验结果表明稀土镧5mg/L使苗鲜重增加,促进丛生芽分化,提高叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量,促进高生长,适合作为增殖培养基中壮苗添加物;烯效唑0.5mg/L则能抑制苗高,提高叶绿素含量,提高植株抗性,适合用作增殖后的壮苗培养。(4)继代5次以上的试管苗,首先在1/2WPM+IBA0.05~0.1mg/L+蔗糖20g/L生根诱导培养基暗培养15d,再转入1/2WPM+蔗糖20g/L正常光照培养,06庐山1#不定根发生率23.33%。(5)子叶添加IBA1.5mg/L后,不定根发生率100%。比较研究了子叶不定根发生中四种内源激素的含量变化,结果表明内源IAA对不定根的发生起关键性作用,根原基的启动需要高的内源IAA,而不定根的形成与根的伸长需要较低的内源IAA水平。IAA/ABA,IAA/GA3比值较好反映出生根过程中几种激素的变化趋势,GA3可能不是影响不定根发生的关键因素。
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