【摘 要】
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为得到纯化的澳洲坚果多糖,采用热水提取多糖,并对其进行分步醇沉。以蛋白脱除率和多糖损失率为指标,比较Sevage法、TCA法、碱性蛋白酶法和碱性蛋白酶-Sevage联用法对60%~90%
【机 构】
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暨南大学理工学院食品科学与工程系;
【基金项目】
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公益性行业农业科研专项(201303077)
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为得到纯化的澳洲坚果多糖,采用热水提取多糖,并对其进行分步醇沉。以蛋白脱除率和多糖损失率为指标,比较Sevage法、TCA法、碱性蛋白酶法和碱性蛋白酶-Sevage联用法对60%~90%醇沉粗多糖脱除蛋白的效果,再利用DEAE-Sepharose Fast Flow及Superdex 200柱层析进一步纯化多糖。结果表明,碱性蛋白酶-Sevage联用法为多糖脱蛋白最佳方法,其最优条件为碱性蛋白酶酶用量1.0%(v/v)、酶解温度50℃、酶解时间3 h,再经Sevage法处理一次,蛋白脱除率达92.3%,多糖损失率为39.9%。随后经DEAE-Sepharose Fast Flow及Superdex 200柱层析纯化得到澳洲坚果多糖纯品(MIPS2a),紫外和红外扫描表明MIPS2a不含蛋白且具备一般多糖类物质的光谱特征,达到了多糖纯化的目的。
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