不同剂量维生素C、E抗氧化作用研究

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目的,通过对实验动物(豚鼠/大鼠)进行不同剂量的维生素C(以下简称VC)或维生素E(以下简称VE)的干预,观察不同剂量的VC、VE对实验动物抗氧化能力、细胞功能及淋巴细胞DNA氧化损伤的影响,并探讨其机理, 方法:1.VC干预实验 采用幼年健康荷兰种豚鼠48只,体重180~240克,雌雄各半,按体重、性别随机分为四组,每组12只。各组豚鼠每天每千克体重VC的添加剂量分别为0(缺乏组)、7.5mg(对照组)、125mg(中高剂量组)、250mg(高剂量组),其中7.5mg/kg/d为豚鼠VC的适宜摄入量,作为正常对照组。实验期为20天,期间饲料和饮水不限。实验10天时留取各组豚鼠尿液。 2.VE干预实验 采用健康初断乳Wistar大鼠39只,体重65~85克,雌雄各半,按体重、性别随机分为三组,每组12-14只。各组VE的补充剂量分别为24.18mg/kg饲料(对照组)、70.83mg/kg饲料(中高剂量组)、114.04mg/kg饲料(高剂量组),其中第1组饲料VE的含量为大鼠适宜摄入量(约35IU),作为对照组。实验期为8周,饲料及饮水不限。实验过程中,每周称大鼠体重,第8周留取尿液。 3.两组实验结束后,腹主动脉取血,分离获取血浆,收集淋巴细胞、红细胞等。采用单细胞凝胶电泳法检测DNA自发及诱导氧化损伤;采用荧光偏振法测定红细胞膜流动性;采用毛细管电泳法测定尿中O~6-甲基鸟嘌呤的含量;采用荧光法测定大鼠血浆VE;用2、4-二硝基苯肼法测定豚鼠血浆VC;采用试剂盒测定血浆中SOD、MDA以及GSH-Px。 结果: 一、维生素C干预实验研究结果显示: 1.经过20天的干预,各组豚鼠血浆VC含量间差别较大(F=107.595,P<0.001),缺乏组血浆VC含量为6.26μmol/L,而对照组、中高剂量组和高剂量组分别升高2.91倍(24.46μmol/L)、8.36倍(58.62μmol/L)和9.30倍(64.45μmol/L)。 2.血浆抗氧化指标分析结果显示:各组血浆SOD差别无统计学意义(F=1.151,p>0.05);血浆MDA水平:缺乏组为2.20nmol/ml,明显高于其余VC干预组中文摘要 (F=4 .60,P<0 .01)。GSH-Px活力缺乏组为265.93酶活力单位,明显低于对照组 321 .20酶活力单位(P<0 .05);而VC补充中高剂童、高剂量组GSH-Px含量与缺 乏组和对照组相比无明显差异(P>0.05),研究结果未发现在补充VC后血浆 GSH-Px水平有明显提高。3.红细胞膜流动性分析结果显示:VC缺乏组的荧光偏振度(P)和微粘滞度(n) 明显高于VC干预组(F值分别为4.241、4.747,P值分别小于 0.05和0.01)。其 中,缺乏组P值为0.3049,对照组0.2817,中高剂t组和高剂盘组分别为0.2791、 0.2770。说明缺乏组豚鼠红细胞膜流动性较其余三组均降低,差别有统计学意义 (P<0 .05);而补充较高剂量VC的两组及对照组红细胞膜流动性差异无显著性 (P>0.05)。4.淋巴细胞DNA损伤情况:各组自发损伤差别无统计学意义(F句.453,P>0.05)。 10pmo比的HZ仇诱发DNA损伤时,各组间差异有显著性(F==2 .700,P<0 .05); 对照组损伤最轻(AU=72.56),而缺乏组(AU== 1 2729)及中高剂量组(AU== 121)、 高剂量组(AU=133)DNA损伤均较对照组加重(P值均小于0.05),补充VC没 有表现出对DNA损伤的保护作用。而25 p inoUL及50pmo比的玩伍诱发DNA 损伤时,各组间差异均无统计学意义(F值分别为0.542、0.746,P值均>0 .05)。 尿中06一甲基鸟嗦吟含t分析,各组06一甲基鸟嗦吟的含t差异有统计学意义 (F== 3.028,P<0.05),缺乏组较高,为3.科叫九肌醉,与对照组(l .48m眺肌 配)相比差异有统计学意义(P<0 .05),补充组尿06.甲基鸟嗦吟的含盘较缺乏组 偏低,稍高于对照组,但各组间差别无显著性。二、维生素E干预实验研究结果显示:1.各组血浆vE含童分别为8.“叹办,56.94m留L,64.34m目工(F值为74.76,p<0 .01). 中高剂量组及高剂!组血浆VE含量均明显高于对照组,其含盘分别为对照组的 6.6倍、7.4倍(p值均小于0.01);补充VE的两组间差别无统计学意义(P沁.05).2.DNA损伤研究结果显示:VE干预各组淋巴细胞DNA自发损伤率均较低,各组 l’ed差别无统计学意义(F值为0.555,P>0.05)。当5 pmo比、10 pmo比及25p mo讥的H刃:诱发DNA损伤时,各组损伤均明显加重,但组间差异无显著性 (P>0.05),随着玩仇剂t的增加,高剂量VE没有表现出对DNA损伤的保护 作用。3.DNA烷化产物护一甲基鸟嗦吟分析结果显示:留取的24小时尿液各组尔甲基 鸟嗓吟的含量差异无显著性(F=2 .493,P>0.05),但中高剂童组及高剂t组较对 照组含量有逐渐增高的趋势。 结论:VC干预实验组中文摘要1.豚鼠缺乏VC将会出现相应的缺乏症状,如:倦怠、出血、关节肿胀、瘫痪等; 而补充较高剂量的VC对豚鼠的生长发育没有明显作用。2.维生素C缺乏可导致豚鼠体内抗氧化物酶GSH一Px含量降低,M[DA含量增高, 但对SOD活性变化不明显,甚至有升高的趋势:VC缺乏可致红细胞膜流动性降 低。补充较高剂量的VC对其无影响。3.VC缺乏及补充较高剂t的VC对DNA自发损伤无改变:而在低剂l的HZOZ诱 导损伤时,VC缺乏及
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