根肿病是根肿菌专性寄生、危害油菜等十字花科作物的世界性土传病害之一。病原菌存活时间长,生理小种多,分布范围广,目前还没有相应的特效防治药。甘蓝型油菜是油菜中种植面积最广的栽培种类,几乎所有甘蓝型油菜品种缺乏对根肿病的抗病性,感病后会使其产量、品质显著下降。本试验以康定地区特定根肿病抗性差异显著的甘蓝型油菜自交系为亲本,通过配制多世代、重测序技术和In Del分子标记,研究根肿病抗病基因的遗传规律和对相关基因进行初步定位。主要研究结果如下:1.以稳定的甘蓝型油菜自交系MC0411和N109-7为亲本,配置了七个世代:P1、P2、F1、RF1、F2、BC1和BC2。田间病土和室内人工接种两种方式鉴定结果表明亲本MC0411完全免疫,N109-7高感,其抗感性稳定,可用于根肿病抗性遗传规律分析实验。正反交均表现高感,表明抗病性为隐性基因控制的细胞核遗传。对六个世代进行室内人工接种,采用SEA-G6软件分析,根据AIC最小原则和适合性检验筛选出根肿病抗性遗传的最佳模型为2MG-AD,即2对加性-显性主基因控制。由遗传参数可知,BC1主基因遗传率为88.55%,BC2的主基因遗传率为61.21%,F2主基因遗传率为90.65%,表明根肿病的抗性主要由主基因控制,同时环境对其也有一定影响。2.将F2分离群体的两极端植株和亲本进行基因组重测序,通过SNP和In Del位点的关联分析,获得根肿病抗病基因的候选区域,即A02染色体上的五个区段chr A02-12,330,000-15,330,000,chr A02 15,360,000-15,390,000,chr A02 17,360,000-19,900,000,chr A02 20,070,000-20,100,000,chr A02 20,720,000-20,740,000,共5.62Mb,包含588个基因。在候选区域内共注释到581个基因,其中亲本间存在的非同义突变基因共注释到158个,移码突变基因共注释到40个。3.将51对In Del引物在两亲本中进行PCR扩增,其中有多态性的引物共25对,多态率为49.02%。用20株F2感病小群体再次对引物筛选,得到8对引物可能与抗病基因连锁。8对引物在F2的248株抗感群体中进行验证,结果表明8对In Del标记都与抗病基因连锁,其中A11543094遗传距离最远,为27.1 c M;A13154138、A14257814、A15250114和A17029296标记为共分离标记,遗传距离为25 c M;A18390119的遗传距离为24.1 c M;A18698868和A18728551的遗传距离为23.6 c M。4.将重测序的候选区域进行基因注释,得到6个SNP突变基因可能与抗病防御相关,分别为Bna A02g20120D、Bna A02g20700D、Bna A02g20930D、Bna A02g21790D、Bna A02g21850D和Bna A02g22850D。