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菜豆金黄花叶病毒（begomoviruses）在全球广泛分布,严重威胁番茄、木薯、棉花和烟草等经济或粮食作物的安全种植。研究begomovirus的基因功能,有助于深入认识begomovirus的危害机理,并为begomovirus相关病害的绿色防控提供理论支撑。按照基因组构成,begomovirus分为双组份begomovirus和单组份begomovirus。旧世界的双组份begomovirus普遍编码AV2蛋白。目前,研究者对AV2的基因功能还不够清楚。新竹番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl Hsinchu virus,ToLCHsV）是广泛分布于我国南方的一种双组份begomovirus。本研究对ToLCHsV的AV2进行了功能解析,主要实验和结果如下:（1）AV2多克隆抗体的制备和AV2在寄主植物中的积累:将ToLCHsV AV2的开放阅读框（Open Reading Frame,ORF）克隆到PEASY?-Blunt E1载体,然后将重组子导入大肠杆菌BL21中,实现了AV2的原核表达;以原核表达所得的AV2蛋白免疫小鼠,获得了AV2蛋白的多克隆抗体;以所得抗体进行了Western Blot实验,发现AV2在ToLCHsV侵染的烟草和苎麻中都有积累。（2）AV2影响ToLCHsV侵染的反向遗传学研究:通过定点突变,构建了不能表达AV2的ToLCHsV突变体（ToLCHsV-ΔAV2）;以ToLCHsV-ΔAV2接种寄主植物,发现ToLCHsV-ΔAV2仍能侵染本氏烟（Nicotiana benthamiana）和普通烟（N.tabacum）,并造成严重症状。然而,在症状诱导时间上,ToLCHsV-ΔAV2比野生型ToLCHsV慢2天（本氏烟）或9天（普通烟）。在病毒积累水平上,ToLCHsV-ΔAV2也显著低于野生型ToLCHsV。（3）AV2对转录水平基因沉默（Transcriptional gene silencing,TGS）的抑制活性研究:将AV2的ORF构建到pGR107载体,获得表达AV2的重组马铃薯病毒X（Potato virus X,PVX）PVX-AV2;以PVX-AV2侵染16C-TGS本氏烟,发现异源表达的AV2能降低16C-TGS本氏烟中35S启动子的胞嘧啶甲基化水平,提升该启动子下游的GFP mRNA的表达,这表明AV2对TGS具有抑制活性。支持这一点的是,本研究通过重亚硫酸盐测序发现,ToLCHsV-ΔAV2基因组在本氏烟中的甲基化水平显著低于野生型ToLCHsV。（4）AV2对转录后基因沉默（Post-Transcriptional Gene Silencing,PTGS）抑制活性的研究:将AV2的ORF构建到了瞬时表达载体pEarlyGate100,获得pEarlyGate100-AV2;将pEarlyGate100-AV2以农杆菌注射的方式与一个表达GFP mRNA的二元载体（35S-GFP）共同导入16c本氏烟叶片,发现共表达AV2与GFP的区域在农杆菌注射后的第5天仍保持较强的GFP荧光,并伴有较高水平的GFP蛋白的积累（相较于阴性对照）,这表明AV2能抑制PTGS的发生。（5）AV2 TGS和PTGS抑制活性关键位点的鉴定:通过定点突变,构建了AV2突变体:AV2C89S（第89位的半胱氨酸变成丝氨酸）,将该突变体的ORF构建到pGR107和pEarlyGate100载体,研究了它的TGS和PTGS抑制子活性,发现AV2C89S丧失了TGS和PTGS抑制活性。（6）TGS和PTGS抑制活性对AV2功能发挥的重要性研究:通过定点突变,构建了表达AV2C89S的ToLCHsV;以ToLCHsV突变体分别接种普通烟和本氏烟,发现表达AV2C89S的ToLCHsV的突变体在侵染性上与ToLCHsV-ΔAV2相近。综上,本研究表明AV2对ToLCHsV不是必须的,但AV2能显著促进ToLCHsV对寄主植物的侵染。AV2功能的发挥与其TGS和PTGS抑制活性密切相关（影响AV2 TGS和PTGS抑制活性的C86S突变影响病毒的侵染性）。本研究加深了我们对ToLCHsV侵染机理的认识,也为进一步明确双组份begomovirus AV2的基因功能奠定了重要基础。