侧向流动分析（LFA）是现场检测最有应用潜力的工具之一,随着适配体技术的发展,基于适配体的侧向流动分析（Apt-LFA）在小分子检测中显示出广阔的应用前景。目前,Apt-LFA技术已经被广泛关注,但是在筛选出的众多适配体中,只有少数适配体被成功应用于此技术中。啶虫脒是新型氯化烟碱类杀虫剂,具有神经毒性,由于良好的溶解性而易在果蔬茶叶等食品中产生残留。基于此,我们对于小分子Apt-LFA方法进行了探索,并将其应用于啶虫脒检测。主要研究内容和结果如下:1、设计了一种聚腺嘌呤（poly A）充当锚定块的Au NPs@poly A-c DNA纳米探针并将其应用于啶虫脒检测的Apt-LFA方法。通过仔细分析Au NPs@poly A-c DNA纳米探针与适配体的杂交位点和长度对于Apt-LFA检测性能的影响并对LFA试纸的实验参数进行优化,该Apt-LFA检测啶虫脒的线性范围为5-200 ng/m L,检测限为0.33 ng/m L,远远低于EPA的限定标准3 mg/kg,这是首次将Apt-LFA技术应用于啶虫脒检测。同时,通过分子对接模拟分析,确定了啶虫脒适配体中的关键结合碱基。将其与优化得到的纳米探针碱基序列进行比对验证,我们得出上述探针成功设计的关键因素。这为小分子Apt-LFA的设计和开发提出了一个关键要点。同时,该Apt-LFA被成功应用于检测番茄和油菜样品中加标的啶虫脒,回收率在94%到106%之间。2、构建了一种基于三螺旋二价适配体和Au@Pt纳米酶检测啶虫脒的Apt-LFA新方法,实现了啶虫脒的快速和高灵敏度检测。研究发现,末端固定的三螺旋二价适配体可以稳定适配体的发夹结构,显著改善适配体的靶标结合效果。基于此,三螺旋二价适配体与靶标结合的时间可从60 min缩短到10 min。此外,Au@Pt NPs具有出色的过氧化物酶活性,用Au@Pt代替Au NPs作为信号标签,通过催化底物显色,可以提高检测线的信号强度,从而提高Apt-LFA的检测灵敏度。该Apt-LFA检测啶虫脒的线性范围为1-150 ng/m L,检测限为0.068 ng/m L。相比于胶体金Apt-LFA,其灵敏度提高了5倍。同时,将该Apt-LFA应用于番茄样品中啶虫脒的检测,获得了90%至105.5%的良好回收率。3、构建了一种自动输送底物的纳米酶Apt-LFA检测新平台。该平台在纳米酶探针捕获和信号放大反应之间实现了可控时间间隔的自动顺序反应,简化了手动滴加纳米酶底物的步骤。通过将显色底物负载在棉线上,以及采用蔗糖屏障用于调节试纸条上底物的流动延迟,实现了在试纸条上自动输送底物的显色反应。所构建的底物集成纳米酶Apt-LFA检测啶虫脒的线性范围为1-150 ng/m L,检测限为0.072 ng/m L。可以获得与手动滴加显色液的试纸条相当的检测灵敏度。上述可控底物自动输送设计为提升纳米酶LFA试纸的便捷性提供了新方案。同时,将该方法应用于油菜样品的加标检测,回收率在95%到106.4%的范围内。