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目的:观察蛋白尿肾损害大鼠血浆凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)与血管内皮生长因子(VEGF)表达及两者的相关性,分析TSP-1、VEGF在早期肾纤维化形成过程中的作用和蛋白尿致肾小管间质纤维化发生发展的机制。方法:以45只体重为200-220g雄性SD大鼠为研究对象,行右肾切除术。随机分为BSA组(牛血清白蛋白模型组,30只)和Saline组(生理盐水对照组,15只)。分别于第1周末、第5周末和第9周末三个时段点随机取BSA组大鼠10只和Saline组大鼠5只,收集24小时尿液,静脉采血后处死。用酶联免疫吸附法和免疫印迹法检测血浆VEGF和TSP-1在蛋白水平上的表达。并测定肝肾功能等临床生化指标和同期24小时尿蛋白排泄量。取肾皮质分别进行光镜检查、免疫荧光检查和电镜分析,计算肾小球硬化指数(GS指数)和肾小管间质病理积分(TIL积分)。分析各指标在SD大鼠肾小管间质纤维化病变进展过程中的变化特点及相关性。结果:1、BSA组大鼠用药1周后,24小时尿蛋白排泄量明显升高,两组差异有显著性,BSA组20.60±9.22,Saline组3.43±1.11,P<0.01;于第5周末达到最高峰,BSA组158.29±36.24,Saline组8.45±4.00,P<0.01;随后出现短暂下降,但仍处于较高水平,至第9周末差异仍有显著性,BSA组104.87±87.27,Saline组14.08±3.86,P<0.05。血生化指标未出现肾功能衰竭的改变,血尿素氮和肌酐清除率BSA组和Saline组均有显著差异(P<0.05)。光镜下BSA组肾小球硬化指数(GS指数)和肾小管间质病理积分(TIL积分)均显著高于Saline组结果(P<0.05),出现早期肾间质纤维化的病理特征。免疫荧光检查可观察到,BSA组IgG沉积于肾小球系膜区和少数毛细血管袢,随着病程进展强度递增。电镜分析可观察到随着病程进展,足突细胞肿胀,足突进一部融合,肾小管上皮细胞逐渐萎缩变小,肾间质不断增宽,胶原纤维和间质细胞增生,炎性细胞浸润。2、BSA组血浆VEGF浓度第一周末明显高于Saline组,两者有显著性差异,BSA组57.81±23.8,Saline组19.87±22.7,P<0.05;第5周末达到高峰,两组存在非常显著性差异,分别为BSA组187.7±49.8,Saline组25.0±20.66,P<0.01;第9周末VEGF浓度下降,但两组间仍存在非常显著性差异,分别为BSA组92.3±18.44,Saline组17.4±9.72,P<0.01。3、血浆TSP-1表达BSA组第一周末仅可见微弱上升,和Saline组比较无明显差别,P<0.05;BSA组第5周末较之Saline组明显增加,分别为BSA组0.77±0.12,Saline组0.58±0.10,P<0.05;到第9周末BSA组增至1.03±0.21,Saline组0.61±0.08,P<0.01,两组间有非常显著性差异。4、各时间点BSA组大鼠血浆VEGF浓度与24小时尿蛋白排泄量均呈正相关,第1、5、9周末的相关系数分别为r1w=0.906(P<0.01),r5w=0.897(P<0.01),r9w=0.635(P<0.05)。5、在BSA组内,血浆VEGF浓度与同一时间点血浆TSP-1相对含量呈负相关,第1、5、9周末的相关系数分别为r1w=-0.777(P<0.01),r5w=-0.916(P<0.01),r9w=-0.923(P<0.01)。6、血浆TSP-1表达与小管间质病理积分呈正相关,第1、5、9周末的相关系数分别为r1w=0.855(P<0.01),r5w=0.700(P<0.05),r9w=0.822(P<0.05)。7、第一周末血浆VEGF浓度与小管间质病理积分无相关性,相关系数r1w=-0.526(P>0.05),在第5周末开始呈负相关,相关系数r5w=-0.771(P<0.01),r9w=-0.906(P<0.01)。结论:1、蛋白尿肾损害大鼠模型血浆VEGF含量与24小时尿蛋白排泄量变化趋势一致,说明血浆VEGF的表达与尿蛋白排泄有关,VEGF可能在蛋白尿的发生机制中起重要作用。2、血浆TSP-1浓度在不同时间点和肾间质病理积分呈正相关,TSP-1可能是蛋白尿肾损害大鼠肾间质纤维化的早期重要指标之一。3、血浆VEGF浓度与血浆TSP-1浓度呈负相关,TSP-1表达增高可能抑制VEGF的表达,促进肾间质纤维化的发生、发展。