斜纹夜蛾(Spodoptera litura)是全球性分布的农业害虫,具繁殖快、食性杂等特点,斜纹夜蛾对农药抗性的日益增强,常用农药将逐渐降低对斜纹夜蛾的治理效率,探究其中的原因并采取措施已经迫在眉睫。斜纹夜蛾具有完善的嗅觉感受系统,而化学感受蛋白(Chemosensory Protein)作为其中不可缺少的组成部分,扮演着重要的角色。研究表明,农药与害虫嗅觉系统有着密不可分的关系。因此,有必要对斜纹夜蛾化学感受蛋白的功能及农药与斜纹夜蛾化学感受蛋白之间的相互关系进行研究。本研究克隆了16个斜纹夜蛾化学感受蛋白(SlituCSP)基因,对16个SlituCSP进行了系统发育、WebLogo、三维结构、信号肽等生物信息学分析。通过荧光定量PCR分析了16个SlituCSP在雌雄触角中的表达水平差异及在雄蛾中的组织表达特性,结果显示,15个SlituCSP在雄性触角中的表达水平高于雌性触角,SlituCSP在雄性各个组织中均有表达,部分SlituCSP在特定组织中表达水平较高,和表达量低的组织相比,其差异甚至达到千倍以上。用毒死蜱、甲维盐和氟虫腈等三种治理斜纹夜蛾的常用农药对斜纹夜蛾雄蛾进行处理,通过荧光定量PCR检测SlituCSP基因表达量,发现三种农药的处理时间越长,SlituCSP受影响程度越大,被诱导的基因数量增多。通过斜纹夜蛾雄蛾的组织表达特性分析,筛选出4个在触角中表达相对较高的SlituCSP,检测这4个SlituCSP的时空表达(发育、地域)和生物因子(性信息素)、逆境因子(饥饿、温度)影响下的表达,结果显示不同发育阶段的4个SlituCSP的表达有显著差异,且不同地域之间也有着不同的表达水平。其次,性信息素对4个SlituCSP的表达也有较大影响,而饥饿、温度对SlituCSP的表达几乎没有影响。为研究斜纹夜蛾CSP能否直接结合农药,我们将SlituCSP6、SlituCSP8、SlituCSP9和SlituCSP18克隆到原核表达载体Pcold-TF载体上,进行原核表达及蛋白纯化,用荧光报告子竞争结合方法测定4个SlituCSP与三种农药纯品的结合特性。结果显示,SlituCSP18与毒死蜱有非常强的结合能力,解离常数为5.89μmol/L。用三种农药处理斜纹夜蛾发现,毒死蜱对斜纹夜蛾的存活率影响最大。因此,我们通过对Slitu CSP18进行RNA干扰,即在下调Slitu CSP18的表达水平的同时进行农药处理,结果表明,在Slitu CSP18的表达下调后,与注射GFP(对照组,常用内参基因)对比,毒死蜱对斜纹夜蛾雄蛾的存活率影响显著,及存活率显著降低。综合上述结果推测:SlituCSP18与毒死蜱可能有着极为密切的关系。探究SlituCSP的表达特性和功能,以及与农药之间的关系,既有助于推进昆虫嗅觉机理的研究和我们对斜纹夜蛾抗药性机理的理解,也为斜纹夜蛾的抗药性治理提供重要的基础。