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亲和色谱是分离分析各类生物分子的强有力工具,硼亲和色谱是其中重要的一类。硼亲和色谱是利用硼酸作为配基的亲和色谱方法,其作用机理是在较高pH值下硼酸与含顺式二羟基的化合物形成复合物,而当环境pH值较低时,复合物解离,释放出顺式二羟基化合物。这一特性赋予了硼亲和色谱材料选择性识别和萃取含有顺式二羟基结构的各类生物分子的能力,其中苯硼酸为功能基的硼亲和色谱材料应用最多,已成功应用于生物分子的富集、纯化、分离。硼亲和整体柱作为一种新型的硼亲和色谱柱,具有独特的多孔结构、较大的比表面积以及良好的渗透性,是亲和色谱分离的良好衍生载体。刘震研究组系统地研究的硼亲和整体柱的制备和应用,系统地考察了分离机理,制备了一系列不同结构和性能的硼亲和毛细管整体柱,成功应用于核苷和糖蛋白等生物分子的专一性富集与分离。已经发现,疏水性相互作用是影响硼亲和整体柱对顺式二羟基化合物的选择性的主要因素。同时,苯硼酸的工作pH值是影响实际应用的一个重要因素。本论文主要针对这两个问题展开研究工作。 为了制备亲水性的、工作pH值较低的硼亲和整体柱,我们选择了亲水性较好的3-丙烯酰胺苯硼酸(APBA)和甲叉双丙烯酰胺(MBAA)分别作为功能单体和交联剂,制得的整体柱具有较强的亲水性,从而消除了疏水作用引起的非特异性吸附。同时,由于APBA有比较低的pKa值(8.2),该整体柱的工作pH值较低,在pH7.5的条件下,实现了腺苷的特异性抓取。此外,由于APBA具有一定的间隔臂,该硼亲和整体柱的萃取容量大。此外,使用该整体柱上,可以对糖蛋白特异性抓取,但由于在中性条件下糖基与苯硼酸的作用力弱,抓取条件仍需要较高的pH。 此外,本论文以对乙烯基苯硼酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚的毛细管涂层柱即poly(VPBA-co-EDMA)作为管内固相微萃取(in-tube SPME)萃取柱,考察并优化了管内硼亲和固相微萃取(in-tube BA-SPME)-高效液相色谱全自动在线联用方法的性能。由于硼亲和萃取柱能消除非顺式二羟基化合物的干扰,该联用方法所得结果能反映实际样品中顺式二羟基化合物分布的指纹信息。以三种不同品牌的无糖茶饮料作为实际样品,考察了该联用方法的实用性。结果表明,使用该联用方法得到的结果可以反映出不同茶饮料的来源差异。最后,利用该联用平台的分析结果作为评判依据,考察了沏茶温度对于茶水中顺式二羟基化合物的含量的影响。结果表明,太高和太低的温度都会导致低的顺式二羟基化合物含量。