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2012年1月至6月份期间,新疆石河子周边某些猪场,2-7日龄哺乳仔猪陆续发生严重腹泻,先后死亡仔猪800余头,发病率90%,死亡率80%。患病仔猪精神沉郁,食欲废绝,排黄色水样稀粪,病程3-5d。病理剖解可见:肠系膜充血严重,肠系膜淋巴结肿大,小肠粘膜菲薄,剪开小肠其内容物呈黄色且含大量未消化的凝乳块。根据临床症状、流行病学及病理变化初步诊断为大肠杆菌引起的仔猪黄痢;为进一步确诊,对送检病料进行了致病菌的分离、生化鉴定、致病因子和毒力鉴定、病原体的分子生物学诊断,结果如下:1.无菌采取病死哺乳仔猪肠内容物、肠系膜淋巴结等病理组织,涂片染色、镜检,同时将病料接种于LB肉汤中培养,将培养菌分别接种于麦康凯琼脂平板,兔鲜血琼脂平板;对分离致病菌进行生化试验、分子生物学鉴定、药物敏感试验。结果表明:分离株在麦康凯培养基上呈红色菌落;可使小白鼠在8h内死亡;生化鉴定及PCR鉴定为大肠埃希氏杆菌;分离株大肠杆菌对头孢菌素类和β-内酰胺类药物敏感。2.通过PCR法和甘露糖血凝MRHA试验检测大肠杆菌的菌毛粘附素类型,采用兔回肠结扎试验检测不耐热肠毒素LT,运用乳鼠胃内注射试验检测耐热肠毒素STa。PCR和MRHA结果表明本试验分离的大肠杆菌致病因子为987P,兔回肠结扎试验未检测到LT,乳鼠胃内注射试验未检测到STa。将致病大肠杆菌培养液100℃煮沸30min,取0.5mL注射给小白鼠,小白鼠在8h内死亡,表明分离株致病大肠杆菌可能有其它种类的耐热肠毒素。3.用RT-PCR法检测病死仔猪肠内容物中猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV),结果仅检测到PEDV,将PEDV的M基因和N基因与不同来源的PEDV毒株进行比较分析,结果显示本试验检测到的PEDV M基因与其他已发表的PEDV毒株M基因同源性为97.9-99.7%,N基因同源性为95.1%-96.4%;试验检测的PEDV的M基因与国内分离的CH-SC2-2012在同一分支上;PEDV的N基因与国内分离的YT12-4在同一分支上。试验室诊断确定该猪场发病的主要病因为携带987P菌毛的致病性大肠杆菌和猪流行性腹泻病毒混合感染。