乳酸菌可以抑制病原菌定植,促进宿主肠道菌群平衡,提高机体免疫力。母乳源乳酸菌,作为共生微生物,食用安全并可定植于新生儿肠道,增强新生儿免疫力,降低其感染频率和患病程度。然而,目前关于母乳源乳酸菌对新生儿影响的研究甚少。为此,本文探究了母乳源植物乳杆菌WLPL04对母鼠及其仔鼠免疫和肠道菌群的影响。第一章引言在对肠道菌群、益生菌以及母乳源益生菌概述的基础上,综述了乳酸菌对新生儿的影响和妊娠期细菌移位的研究进展,并对母乳源乳酸菌的开发应用进行了展望。第二章采用孕鼠动物模型,研究了植物乳杆菌WLPL04和FLPL05对母鼠及仔鼠免疫的影响。首先,监测了实验期间母鼠体重、泌乳量和仔鼠体重的变化,发现植物乳杆菌WLPL04显著提高了哺乳后期母鼠体重,但不影响其泌乳量和哺乳期结束时的脏器指数。通过肠组织H&E染色,发现母鼠灌胃植物乳杆菌不会破坏母鼠及仔鼠肠组织结构的完整性。但与Control组对比,灌胃植物乳杆菌WLPL04第2周(P<0.01)和第3周(P<0.05)仔鼠的体重有显著性差异,第1周(P<0.01)和第3周(P<0.001)仔鼠肝和肾的脏器指数亦有影响。其次,通过活菌计数检测了菌株在母鼠及仔鼠体内的定植和移位情况,结果表明植物乳杆菌WLPL04能够定植于母鼠肠道并移位至其他器官(肝、肾、脾和乳腺),植物乳杆菌FLPL05只存在于母鼠肠道中;而仔鼠肠道内均能检测到两株菌。最后通过酶联免疫和免疫荧光分别测定了母鼠及仔鼠血清中细胞因子的含量以及仔鼠器官中T淋巴细胞的分型,结果发现植物乳杆菌WLPL04能够显著提高母鼠血清中IL-4、IL-6和仔鼠血清中IL-6的表达水平,显著增加仔鼠脾中CD4+T淋巴细胞的比例,从而使母鼠及仔鼠的Th1/Th2反应向Th2反应极化。第三章探究了植物乳杆菌WLPL04对母鼠及其仔鼠肠道菌群的影响。首先分析了哺乳期结束时母鼠肠道菌群和仔鼠出生后1至4周肠道菌群的变化。结果发现,WLPL04组母鼠肠道菌群的α-多样性与Control组和FLPL05组相比无显著性差异(P>0.05),然而其肠道菌群的β-多样性明显高于其他组。从门分类水平上看,母鼠肠道中拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)的含量高,WLPL04组中厚壁菌门的比例相对其他组较高;从属分类水平上看,母鼠肠道中主要为普氏菌属(Prevotella),而WLPL04组仔鼠肠道菌群的α-多样性和β-多样性较高,表明其物种丰富。门水平分析发现,仔鼠肠道菌群中厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度较高,且不同时间点细菌的比例不同。其次,从属分类水平上分析了哺乳期第1周和第2周乳汁中的微生物变化,结果显示第1周乳汁微生物群主要由乳杆菌属(Lactobacillus)和凝聚杆菌属(Aggregatibacter)组成,第2周乳汁微生物主要由乳杆菌属、凝聚杆菌属和韦荣球菌属(Veillonella)组成,而WLPL04组中乳酸杆菌属的比例在增加。最后分析了 WLPL04组仔鼠肠道微生物和乳汁微生物间的相关性,结果发现相同的菌属有乳杆菌属、凝聚杆菌属和韦荣球菌属。第四章优化了植物乳杆菌WLPL04发酵培养基的组成。采用响应面分析预测了培养基的最佳组成为1.79%的葡萄糖、1.69%的酵母提取物和0.12%的K2HPO4。采用冷冻干燥技术制备了植物乳杆菌WLPL04的微生态制剂,其存活率为 35.87%。第五章就植物乳杆菌WLPL04对母鼠及其仔鼠免疫和肠道菌群的影响以及植物乳杆菌WLPL04制剂的制备进行了总结,并对后续研究进行了展望。综上所述,本文探究了植物乳杆菌WLPL04对母鼠和仔鼠免疫和肠道菌群的影响,并制备了植物乳杆菌WLPL04的微生态制剂。本文为母乳源植物乳杆菌的开发应用提供了技术依据,为其在母婴产品和食品领域的应用奠定了工作基础。