耐辐射奇球菌mscl基因的功能性研究及菌株S14-83~T的多相分类学研究

来源 :武汉大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:starylove
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
耐辐射奇球菌由于其强抗逆性的特点引起生物学家对其机制进行了广泛研究,而机械敏感性通道蛋白被认为是细菌应对低渗胁迫导致的膜张力变化的主要通道,而两者之间的关系至今尚未有人研究,因此我们对耐辐射奇球菌的MscL通道展开了研究。由于利用膜片钳技术测得的单通道开放状态是机械敏感性离子通道开放的主要证据,因此,我们对回补了耐辐射奇球菌基因mscl(D-mscl)的大肠杆菌D-MJF465菌株进行了膜片钳试验。实验结果表明,在菌株D-MJF465中能检测到MscL通道电流,且其通道开放的压力阈值为53 mmHg,通道电导为3.37 nS。为保证今后在耐辐射奇球菌体内直接对该通道进行研究,我们优化了菌株R1大原生质球的制备条件,该菌在LB培养基中培养至OD600=0.45且使用1200 ug/mL浓度的溶菌酶处理下可以形成较大且光滑的原生质球。其次,我们成功构建了耐辐射奇球菌的mscl基因敲除菌株mDR1,缺失mscl基因的菌株出现了耐碱性(pH 8.0)、耐高渗(1%氯化钠和0.6 M葡萄糖)能力的下降。同时我们发现耐辐射奇球菌在低渗处理下会由多聚体形态向单体形态转变,这与其他细菌在低渗处理下容易致死的特点显著不同,而mscl基因的缺乏能够促成这种转变。另外,mscl基因敲除菌株的耐干旱和耐辐射能力都有明显下降,推测mscl基因与耐辐射奇球菌的强抗逆性相关。另外,我们从南极洲南设得兰群岛采集的土壤样品中分离出一株不具运动性、严格需氧的革兰氏染色阴性球形细菌S14-83T。基于16S rRNA基因序列的系统发育分析表明该菌株是奇异球菌属的一个新成员,与其亲缘关系最近的菌株Deinococcus alpinitundrae具有最高同源性96.1%。该菌株的基因组大小为4.4 M,含有两个成环的核基因组及5个质粒,DNA G+C含量为61.09 mol%,主要呼吸醌为MK-8。主要的细胞脂肪酸为Summed feature 3(C16:1ω7c/C16:1ω6c)和C16:0。细胞壁中含有奇球菌属特有的鸟氨酸。主要的极性脂质为氨基磷脂和糖脂以及一些未知的极性脂质。菌株S14-83T显示出对γ辐射(>10 kGy)和UV辐射(460J/m2)的极强抗性。基于以上系统发育、化学分类学和表型分类学特征,将该菌认定为奇异球菌属的一个新种,因其耐冷性将其命名为耐冷奇球菌Deinococcus psychrotolerans,模式菌株是S14-83T(=CCTCC AB 2015449T=DSM 105285 T),在该菌较长的核基因组上找到了可能的mscl基因序列,其编码的MscL特点与其他来源的通道具有一致性但也有差别,这为研究不同特征及来源的耐辐射奇球菌的MscL通道功能提供了新的材料。
其他文献
本学术论文的目的是把握员工成就认知对员工建言的基础理解,以及雇佣者的认知如何影响员工表达的意愿。本研究的关联性有助于缩小公司内不同层级之间的差距。本研究现实意义
近几年来,随着无线通信技术、微电子技术的不断进步,无线传感网络得到了快速发展。然而,随着越来越多的WSN程序被部署到实际应用中,这些应用也常常因为软件质量问题而产生不
识别场所的个性化语义是普适计算的重要研究方向。现有方法的问题有:1)大多仅考虑场所访问在时间和空间上的信息,未充分利用与场所语义密切相关的情境信息;2)注重整体识别准
如今,人们对无线设备(如传感器,PDA,无线基站等)的需求在迅速增加而其价格在下降。因此,发展无线网络是至关重要的。由于基于IEEE 802.11的无线局域网(WLAN)的普及流行,人们
半监督学习是机器学习中重要的研究方向。众所周知,大量标记样本能够有助于提高学习器性能,但是收集大量标记样本是耗时耗力的,半监督学习能够将少量的有标记样本与大量的无
近年来,移动互联网技术快速发展,渗透到了人们生活的各个方面。移动设备由于其便携性逐渐取代了传统计算机的地位,成为了新的互联网接口,但是移动互联网在迅速发展的同时,信
随着无线通信的发展,频谱资源匮乏问题日益突出。认知无线电(cognitive radio,CR)技术作为解决该问题最有效的手段之一,可以有效提高频谱利用率。在认知无线电中,如何实现次
深度恢复是计算机视觉领域的基本问题,有着广泛的应用。.其中,基于双目相机的立体匹配是最常用的深度恢复方式之一,有着重要的理论研究和实际应用价值。传统的双目立体匹配算
随着网络的飞速发展和普遍,各种应用产生了海量数据,比如微信、facebook、购物平台等。数据之间存在潜在的关联关系具有不可估量的社会和经济价值,比如进行群体行为分析,辅助
随着人力资源管理在经济社会发展中的重要作用受到了社会各界的高度重视,人力资源服务行业蓬勃发展,基层员工作为人力资源服务行业中的核心竞争力,针对其建立一套吸引优秀人才、激励现有员工、稳定核心员工队伍的薪酬体系对于企业经营发展有着非常重要的推动作用。晨星人力资源服务公司前身为全民事业单位,其大锅饭式的薪酬分配模式已经不能适应当前外部竞争环境的变化,导致基层员工积极性不高、核心员工流失严重等情况。本文以