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目的1客观评价盆腔炎性疾病后遗症(SPID)的研究现状,探索研究热点及发展趋势。2探究丹白颗粒治疗湿热瘀结型SPID的临床疗效及安全性。3通过网络药理学及分子对接技术探讨丹白颗粒治疗SPID的作用机制。4探讨丹白颗粒治疗SPID的分子机制,对上述网络药理学预测结果进行验证。方法1文献回顾:基于2000年1月至2022年12月中国知网、万方、维普三大数据库的北大核心期刊、CSCD期刊、CSSCI期刊文献数据,筛选主题为中医药治疗SPID的相关文章,采用VOSviewer和CiteSpace软件对文献进行可视化分析,从而对SPID的研究现状进行客观评价,并探索未来的学术前沿及发展趋势。2临床研究:采者前瞻性、多中心、单臂、患者自身治疗前后对照的研究方法,对门诊收集的208例符合纳入标准的SPID患者予丹白颗粒治疗,连续用药2个月经周期(经期停药),观察治疗前后患者的中医证候积分、局部体征评分、视觉模拟评分(VAS)、DASS-21情绪评分、阴道分泌物清洁度、不良反应及治疗前后肝肾功、血常规等安全性指标,用统计学方式进行分析及判定。3网络药理学分析:采用网络药理学对丹白颗粒治疗SPID的作用机制进行分析,并运用分子对接技术对结果进行初步验证,具体方法是从公共数据库中收集丹白颗粒组方的生物活性化合物及其所对应的靶点,并收集SPID的疾病相关靶点,通过R语言得到丹白颗粒治疗SPID的潜在靶点,String数据库构建PPI网络,利用clusterProfiler包完成基因GO和KEGG富集分析,找到丹白颗粒治疗SPID的潜在生物过程和途径,最后用Autoduck软件进行分子对接,计算前六个靶点和前十个化合物之间的结合活性。4实验研究:以SD雌性大鼠为实验对象,采用苯酚胶浆注射+机械损伤+高脂高糖饮食+湿热气候的方法,制备湿热瘀结型SPID动物模型。将42只大鼠随机分为空白对照组,模型组,丹白颗粒低、中、高剂量组,康妇炎胶囊组。干预14天后取材,对大鼠进行形态学观察后,HE染色对子宫组织进行病理学观察,通过ELISA法测各组大鼠血清中IL-6、IL-10、IL-4、TNF-α水平,Western Blot法及RT-PCR法及检测子宫组织中TLR-4/p38 MAPK和NF-κB通路相关蛋白及mRNA的表达水平,并进行统计学分析。结果1中医药治疗SPID的知识图谱分析1.1年发文量分析:近五年来整体发文量不高,表明高质量的学术研究仍需探索;1.2作者合作网络分析:核心作者之间形成了以魏绍斌、周丽、魏丽惠、龚云、曾倩等为代表的研究团队;1.3关键词共现分析:得到排名前30位的关键词如盆腔炎性疾病后遗症、中药保留灌肠、中医药疗法、抗生素、中西医结合、炎症因子、临床观察等;1.4关键词聚类分析:中医药治疗盆腔炎性疾病的研究热点大致分为7类,主要在疾病、机制研究、治疗方式、研究类型、中医治法、疗效评价等方面;1.5关键词时线图分析:近十年年研究热点包括Toll样受体4、氧化应激、信号通路、子宫微循环、随机对照试验、VAS评分、T淋巴细胞亚群等内容;1.6关键词突现分析:近年来的突现词有血液流变学、T淋巴细胞亚群、湿热瘀结、疗效、炎症因子、康妇炎胶囊、生活质量、慢性盆腔痛等,是未来研究方向及热点。2丹白颗粒对湿热瘀结型SPID的临床观察2.1总有效率:总有效率达91.35%,临床疗效显著;2.2中医证候积分:208例患者在治疗1个月后、治疗2个月后与治疗前的中医证候积分相比较,经t检验,差异具有统计学意义(P<0.01);2.3分项证候积分:下腹疼痛、腰骶疼痛、带下量多、带下色黄、带下异味、脘闷纳呆、低热、月经不调、经行腹痛、经期或劳累或同房后腹痛加重、便干、便黏腻、舌质、舌苔等此14项分项证侯同治疗前相比较,经t检验,差异具有统计学意义(P<0.01);便溏、小便色黄等2项证候在治疗前后差异不明显(P>0.05);2.4局部体征:208例患者治疗后与治疗前的局部体征评分相比较,经t检验,差异具有统计学意义(P<0.01);2.5 VAS评分:208例患者治疗后与治疗前的下腹疼痛、腰骶疼痛VAS评分相比较,经t检验,差异具有统计学意义(P<0.01);2.6 DASS-21评分:208例患者治疗后与治疗前的DASS-21评分严重程度相比较,经χ2检验,差异具有统计学意义(P<0.05);2.7阴道分泌物清洁度:208例患者在治疗后,阴道分泌物清洁度有所改善,与治疗前相比较,经χ2检验,差异具有统计学意义(P<0.01);2.8不良反应:在服药期间,有4例患者出现头晕头痛症状,有2例患者出现恶心症状,调整药物后症状消失,无中途被迫停药者;2.9近期随访复发评价:对146例痊愈及显效的湿热瘀结型SPID患者,停药8周后进行随访,8例患者因熬夜、劳累后再次出现小腹隐痛,3例患者再次出现带下量多,余未再出现SPID的相关症状、体征。3网络药理学及分子对接探讨丹白颗粒治疗SPID的作用机制3.1丹白颗粒潜在化合物及作用靶点:潜在化合物46个,作用靶点220个;3.2 SPID疾病靶点:经筛选去重后得到SPID的疾病靶点952个;3.3共同靶点筛选及互作网络构建:绘制韦恩图,获得106个重叠靶点;3.4PPI网络的构建和关键靶点的提取:网络中由106个节点和1968条边组成,IL-6、IL-1β、VEGFA、CASP3、PTGS2、JUN 等是核心蛋白;3.5 GO和KEGG富集分析:得到2978个GO条目,与对脂多糖、细菌来源的分子、氧化应激、化学应激、营养水平的反应等生物过程密切相关;KEGG富集获得152条信号通路,涉及 AGE-RAGE、IL-17、TNF、HIF-1、Toll-like receptor、Th17、PI3K-Akt 等通路;3.6分子对接:核心化合物和潜在靶点分子对接得分均较理想;4丹白颗粒对湿热瘀结型盆腔炎性后遗症大鼠的影响和机制探讨4.1病证结合动物模型的构建:采用苯酚胶浆注射+机械损伤+高脂高糖饮食+湿热环境的复合方法制备湿热瘀结证SPID大鼠模型;4.2大鼠一般表征观察:Model组较NC组大鼠明显呈湿热瘀结证候表现,各治疗组大鼠一般情况及湿热瘀结证候有所缓解;4.3大鼠盆腔粘连评分:与NC组比较,Model组大鼠Verco评分升高(P<0.05);与Model组比较,各治疗组呈不同程度降低(均P<0.05),以DBG-H明显;4.4大鼠子宫组织病理形态学观察:空白组子宫内膜腔壁结构清晰,无充血水肿与坏死脱落,未见炎性细胞浸润肌纤维纹理清晰可见。模型组子宫内膜腔壁结构改变,内膜充血水肿,有大量或层状性炎性细胞浸润,纤维组织增生,上皮细胞变性坏死,腺体萎缩变形。各治疗组均有不同程度的缓解。4.5大鼠血清IL-6、TNF-α、IL-4和IL-10水平:与NC组比较,Model组大鼠IL-6、TNF-α 表达显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10 表达显著降低(P<0.05);与 Model组比较,各治疗组IL-6、TNF-α表达均显著降低(P<0.05),IL-4、IL-10表达均显著升高(P<0.05),但与NC组仍存在差异(P<0.05)。这种变化趋势在丹白颗粒各组呈剂量依赖性,以DBG-H组变化最为明显。4.6 TLR4、p38 MAPK和NF-κB p65的mRNA及蛋白表达结果:与NC组比较,Model组大鼠子宫组织中TLR4、p38 MAPK和NF-κB p65的mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05);与Model组比较,各治疗组大鼠子宫组织中的上述mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),但与NC组仍存在差异(P<0.05),这种变化趋势在丹白颗粒各组呈剂量依赖性,以DBG-H组变化最为明显。结论1中医药治疗SPID的研究开展时间较早,但高质量研究相对缺乏,临床疗效评估呈现多元化,但基础研究仍较为薄弱,需要进一步探索,免疫调控是研究热点之一;2丹白颗粒可以显著改善湿热瘀结证SPID患者的多项临床症状及体征,降低疼痛程度,改善阴道分泌物清洁度,缓解患者焦虑、抑郁、压力情绪,安全性高,远期疗效可观。3通过网络药理学及分子对接初步明确丹白颗粒治疗SPID具有多成分、多靶点、多通路的特点,Toll样受体信号通路是可能是其作用机制之一。4丹白颗粒可以有效改善湿热瘀结型SPID大鼠的一般状态,改善盆腔粘连情况,可能通过调控TLR-4/p38 MAPK和NF-κB信号通路,影响炎性因子表达,调节机体免疫,达到治疗目的。