人类肿瘤浸润γδT淋巴细胞的体外扩增及体内外功能研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ru438185839
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T淋巴细胞可按照T细胞受体的不同分为两种:αβT淋巴细胞和γδT淋巴细胞。γδT细胞表达有别于αβT细胞的独特TCR链,并表现出特殊的组织分布方式。γδT细胞几乎分布于人类所有的脏器,只是比例随器官而有所差异。γδT细胞仅占正常人外周血T淋巴细胞总数的1~10%。皮肤及粘膜处分布有较多的γδT细胞。在机体的免疫应答中,尤其是抗感染免疫的早期,γδT细胞既可以作为免疫效应细胞,同时又可以通过分泌IL—4、IFN—γ等细胞因子行使重要的免疫调节功能。因此,它们也被看作机体抗感染免疫应答的第一道防线。已发现γδT细胞与多种疾病的病理过程有关,在EB病毒以及HIV感染患者的外周血、麻风杆菌感染患者的肺脏、类风湿性关节炎病人的滑膜液、急性多发性硬化症患者的脑脊液、肠炎病人的病灶肠段以及心脏移植患者的急性或慢性移植物排斥过程中均发现有γδT细胞的选择性扩增。虽然γδT细胞已发现十几年,人们对γδT细胞性质和功能研究取得了较大进展,但由于其性质独特、细胞数量少及分离培养较困难等因素的限制,使其性质和功能的某些方面至今仍无定论。 近年来,γδT细胞的独特抗原识别特性和对多种肿瘤细胞的细胞毒活性引起免疫学工作者的极大兴趣。目前,在肺腺癌、胰腺癌、肾细胞癌以及大肠癌等多种肿瘤患者的肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)中证实有γδT细胞亚群的选择性扩增。这些γδTILs表现出独特的抗原识别方式,并对自体或异体肿瘤细胞具有明显的MHC非限制性的细胞裂解活性。正是由于γδT细胞具有如此独特的功能,同时也由于其分离培养等方面的困难,使得一些作者推断,如果能够找到有效的扩增方法,γδT细胞回输将有可能成为针对某些肿瘤的很有前途的过继免疫治疗手段。 本文采用独创性的新方法获得了纯度较高的γδTILs细胞系,并对扩增所得细胞进行了细胞表型、细胞增殖、细胞因子分泌以及细胞毒等多方面的研究。通过固相抗TCRγδ单抗隆抗体的活化,我们由多种肿瘤患者的TILs中选择性扩增了γδT细胞。从小量的肿瘤标本培养开始,细胞在1~2周内开始活化并增殖,随后
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