隔姜灸“神阙”“关元”对类寒湿凝滞型原发性痛经大鼠内分泌相关分子受体基因表达的影响

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目的:观察隔姜灸对类寒湿凝滞型原发性痛经(Primary Dysmenorrhea,PD)大鼠内分泌相关分子及其受体基因表达的影响,探讨其可能的镇痛作用机制。方法:将50只雌性未孕Wistar大鼠适应性喂养2天后,通过阴道涂片法筛选出40只处于动情间期的大鼠,随机分为空白组(blank group)、模型组(model group)、治疗组(treatment group)、对照组(control group)四组,每组10只。造模方法采用腹腔注射缩宫素联合冰水浴。除空白组外,其余各组给予苯甲酸雌二醇(股部,皮下注射),1次/天,连续10天,第1天和第10天0.8m L/只,第2-9天0.4m L/只;第11天给予腹腔注射缩宫素,每只大鼠2U。每天注射苯甲酸雌二醇后,将大鼠的下肢及下腹部浸泡在冰水混合物中进行寒湿刺激(室温18-26℃)30min,1次/天,连续10天。空白组按上述方法与剂量注射生理盐水,但不予冰水浴。治疗方法:治疗组“神阙”“关元”施隔姜灸治疗,对照组采用布洛芬灌胃治疗。治疗组从第8天造模后开始治疗,30min/次,1次/天,共灸3天。对照组从第8天造模后进行治疗,给予浓度为125mg/100m L的布洛芬溶液灌胃,0.8m L/只,1次/天,连续3天。空白组、模型组在相同条件下饲养,不进行治疗。第11天模型组、治疗组、对照组大鼠给予缩宫素、空白组大鼠给予生理盐水后,对大鼠的扭体反应评分和扭体反应潜伏期进行行为学观察。观察结束后,各组大鼠取血清和子宫组织,检测血清中前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)、雌激素(E2)、孕酮(P)含量及子宫组织中前列腺素F2α受体(PGF2αR)、前列腺素E2受体(PGE2R)、雌激素受体(ER)、缩宫素受体(OTR)表达。结果:1扭体行为比较结果显示:空白组大鼠未出现扭体反应。与模型组比较,治疗组、对照组大鼠扭体潜伏期明显延长,扭体反应评分降低(均P<0.01);与治疗组比较,对照组大鼠潜伏期缩短,扭体评分降低(均P<0.05)。2血清PGF2α、子宫组织PGF2α受体mRNA含量比较与空白组比较,模型组大鼠PGF2α及受体mRNA含量显著升高(P<0.01),治疗组、对照组大鼠PGF2α含量均显著升高(P<0.01),受体mRNA无显著差异(均P>0.05);与模型组比较,治疗组、对照组大鼠血清PGF2α及受体mRNA含量均显著下降(P<0.01或P<0.05);与对照组比较,治疗组大鼠血清PGF2α及其受体表达无显著变化(P>0.05)。3血清PGE2、子宫组织PGE2受体mRNA含量比较与空白组比较,模型组、治疗组、对照组大鼠PGE2、PGE2受体mRNA含量均显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组、对照组大鼠PGE2、PGE2受体mRNA含量均显著增多(P<0.01或P<0.05);与对照组比较,治疗组大鼠PGE2、PGE2受体mRNA含量降低(P<0.01)。4大鼠血清E2、子宫组织E2受体mRNA含量比较与空白组比较,模型组、治疗组、对照组大鼠E2、E2受体mRNA显著升高(均P<0.05);与模型组比较,治疗组、对照组大鼠E2、E2受体mRNA含量显著降低(均P<0.01);与对照组比较,治疗组大鼠E2显著降低(P<0.01),E2受体mRNA含量未见显著差异(P>0.05)。5大鼠血清P、子宫组织OT受体mRNA含量比较与空白组比较,模型组、治疗组、对照组大鼠P含量显著降低(P<0.01或P<0.05),OT受体mRNA表达均显著增多(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,治疗组、对照组大鼠血清P含量显著增多,OT受体mRNA表达显著下降(P<0.01或P<0.05);与对照组比较,治疗组大鼠P、OT受体mRNA含量无明显差别(P>0.05)。6子宫组织病理形态学比较模型组大鼠子宫组织可见明显水肿充血。与模型组相比,治疗组子宫水肿充血可见明显改善,对照组未见明显变化。各组大鼠中性粒细胞、淋巴细胞未见明显差异。结论:1隔姜灸类寒湿凝滞型PD大鼠“神阙”“关元”,可明显缓解类寒湿凝滞型PD大鼠痛经症状,明显延长PD大鼠扭体反应潜伏期,降低其20min扭体评分。2隔姜灸类寒湿凝滞型PD大鼠“神阙”“关元”,能明显改善PD大鼠子宫组织的水肿程度。3隔姜灸类寒湿凝滞型PD大鼠“神阙”“关元”,可通过降低子宫平滑肌收缩物质PGF2α、E2含量,升高平滑肌舒张物质PGE2、P含量,达到缓解痛经症状的目的。4隔姜灸类寒湿凝滞型PD大鼠“神阙”“关元”,可下调PGF2αR、E2R、OTR受体表达,上调PGE2R,纠正PD相关内分泌分子受体基因表达失衡,发挥其镇痛作用。
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